ultra structural analysis to elucidate the mechanism of intracellular transport and cellular egress of SARS-CoV-2 using array tomography

Research Project

Project/Area Number	24K10231
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 49060:Virology-related
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	平林愛 (平瀬愛) 京都大学, 医生物学研究所, 特定研究員 (50443015)
Project Period (FY)	2024-04-01 – 2027-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2024)
Budget Amount *help	¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000) Fiscal Year 2026: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000) Fiscal Year 2025: ¥2,860,000 (Direct Cost: ¥2,200,000、Indirect Cost: ¥660,000) Fiscal Year 2024: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Keywords	Array Tomography / 3D-CLEM / electron microscopy / SARS-CoV-2
Outline of Research at the Start	これまでに、連続超薄切片を用いたArray-tomographyによりSARS-CoV-2感染細胞の広範囲を3次元再構築し、その微細構造と抗体蛍光観察、免疫電顕、ノックダウン実験からからCOPⅠがSARS-CoV-2の輸送に関与している可能性を示唆することができた。よって本研究ではCOPⅠのSARS-CoV-2輸送への関与を検証する実験を行う。さらに、3D-CLEM（3次元光―電子相関顕微鏡）法を用いて、感染細胞内を解析することで、ウイルスタンパク質が、どこで、どの宿主因子に、どの様に作用することでウイルス粒子が輸送されるのかを明らかにする。