| Project/Area Number |
24K10246
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
|
| Allocation Type | Multi-year Fund |
|---|
| Section | 一般 |
|---|
| Review Section |
Basic Section 49060:Virology-related
|
|---|
| Research Institution | Shimane University |
|---|
Principal Investigator |
ヌグエ・トン ミャ・ミャッ 島根大学, 学術研究院機能強化推進学系, 准教授 (90772583)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
森田 公一 長崎大学, 熱帯医学研究所, 教授 (40182240)
浦野 健 島根大学, 学術研究院医学・看護学系, 特任教授 (70293701)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2024-04-01 – 2027-03-31
|
| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
|
| Budget Amount *help |
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2026: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2025: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
|
|---|
| Keywords | デング熱 / デングウイルス / エンベロープ（E）タンパク質 / ヒアルロン酸ナノゲル / ワクチン / dengue vaccine |
|---|
| Outline of Research at the Start |
デング熱は蚊によって媒介される感染症で世界人口の約半分が感染の危険にさらされている。世界保健機関（WHO）は，グローバルヘルスに対する10 の脅威の1 つにデング熱を挙げている。特異的抗ウイルス治療薬などの有効な治療法はまだ確立されておらず、ワクチンはこの病気を制圧するための最も望ましい方法である。申請者らのこれまでの新型コロナウイルスに対する次世代ワクチン開発の経験を踏まえ、日本国国民の健康・経済活動維持、外交、国際貢献や安全保障の観点から、他国の事情に左右されることなく、室温での流通が可能で有効性・安全性を兼ね備えたデング熱ウイルスに対する次世代ワクチンの研究開発基盤を本研究により確立する。
|
| Outline of Annual Research Achievements |
デング熱は、蚊によって媒介するデングウイルス感染症で、2023年に入ってから500万人以上の患者が報告され、死者は数万人単位と推計されている。デング熱は世界の公衆衛生にとって大きな課題であり、その対策のための財政的負担は増大している。気候変動都市化の進展・人の移動の増加・貿易の増加など、デングウイルスを媒介する蚊の蔓延が主な原因となっている。日本でも、輸入デング熱患者数が2022年に99人、2023年に175人に増加している。
本研究の実績として、１）ワクチン開発を目的として、まずネパール、ミャンマー、ベトナム、マレーシア、インドネシア各国で流行しているデング熱ウイルスの分離、抗デングウイルス IgMおよびIgGの検出、中和抗体および増強抗体の検出を含む血清学的検査、ウイルス血症レベルの測定、全ゲノム配列決定および系統解析を行った。そして、① 各国で分離されたデングウイルスの特徴と患者（小児、成人）の重症度、② サイトカインを含む宿主因子と患者の重症度の相関性、③ 患者の血清中のウイルス血症レベルと重症度を明らかにした。
２）HA ナノゲルワクチン開発のために、ヒアルロン酸（HA）ナノゲルに包埋するデング熱ウイルスの構造タンパク質エンベロープ（E）を作製した。エンベロープ（E）タンパク質は、人工遺伝子を作製し、哺乳動物発現ベクターに組み込み、哺乳類細胞から分泌タンパク質として発現を確認した。
３）タグのないワクチン用包埋タンパク質の作製：人に接種するワクチンを作製するには、His タグなどの余分のアミノ酸が付加していると規制当局から許可が降りない可能性があるため、タグなしのエンベロープ（E）タンパク質を精製する方法として抗体を用いることにした。文献上抗体遺伝子配列が入手可能な 4G2、3H5、2D22 の３種類の人工遺伝子を作製し、哺乳動物発現ベクターに組み込み、哺乳類細胞から分泌タンパク質として発現させ、発現を確認した。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究計画に通りに、実験が遂行されており、着実に実験結果が出て、さらに論文発表にも至っているため。
|
| Strategy for Future Research Activity |
今後２年間についても、計画通りに、デングウイルスの継続的な血清学的および分子学的サーベイランスを行い、ネパール、ミャンマー、ベトナム、マレーシア、インドネシア各国におけるデング熱疾患の動態に関する一般的な理解を深めるとともに、日本を含めた全世界規模での気候変動に伴う疾患の予防と管理に貢献する。
また、HA ナノゲル包埋タンパク質として、計画にあげていた非構造タンパク質NS1およびNS3の人工遺伝子を作製し、細胞内で発現させ回収・精製する。
精製したエンベロープ（E）タンパク質、非構造タンパク質 NS1 および NS3 を包埋した HA ナノゲルを用いて、計画通りにマウス個体Ｂ細胞・Ｔ細胞応答、中和活性解析、そしてウイルスチャレンジ試験を実施する。
さらに、HAナノゲル複合体の抗体依存性感染増強（ADE）解析を実施する。
本研究により、免疫組織への優れた送達基材であるHAナノゲルを用いることで、室温で輸送できる、より有効で、より安全性の高い全世界に誇れる次世代のデング熱ワクチンを開発できると考えている。
|
