| Project/Area Number |
24K10670
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 52020:Neurology-related
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| Research Institution | Fujita Health University |
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Principal Investigator |
武藤 多津郎 藤田医科大学, 大学病院, 特命教授 (60190857)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
鈴木 元 藤田医科大学, 医学部, 教授 (80236017)
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| Project Period (FY) |
2024-04-01 – 2027-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000)
Fiscal Year 2026: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2025: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
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| Keywords | 神経炎症 / 糖脂質 / 抗中性糖脂質抗体 / inflammation / EMRN / PD / AD / ELISA / 情報伝達 / 神経細胞死 / 蛋白修飾 |
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| Outline of Research at the Start |
最近の学術展開は広く神経難病の発生に自然・獲得免疫の両免疫系の異常に種々の糖脂質代謝異常が深く関わっており、こうした異常が如何に病態発生に関与しているのかその知見の解明が急務となっている．つまり、各神経疾患に於ける脂質・糖脂質異常と免疫系異常の実態解明が新たな治療法開発という観点からも強く望まれており、本研究ではこうした異常の解明をめざして、アルツハイマー病（AD）とパーキンソン病（PD）及び脳脊髄根末梢神経炎(EMRN)に 焦点を絞り研究を進めたい．
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| Outline of Annual Research Achievements |
最近の学術展開は広く神経難病の発生に自然・獲得免疫の両免疫系の異常に種々の糖脂質代謝異常が深く関わっており、こうした異常が如何に病態発生に関与しているのかその知見の解明が急務となっている．つまり、各神経疾患に於ける脂質・糖脂質異常と免疫系異常の実態解明が新たな治療法開発という観点からも強く望まれており、本研究ではこうした異常の解明をめざして、アルツハイマー病（AD）とパーキンソン病（PD）及び脳脊髄根末梢神経炎(EMRN)に 焦点を絞り研究を進めている．
本研究では、先ずEMRNに着目し、我々が2014年に発見したEMRNの特異的な自己抗体である抗中性糖脂質抗体について、測定法の改良を試みた．従来抗体測定法としてはFar-Eastern blot法を用いてきたが、この方法は手間・コスト・時間が掛かってしまう短所があり、こうした短所を克服するため、高純度抗原分子（中性糖脂質）を用いたELISA法の開発に取り組んだ．ELISA法では、短時間に多数の検体の検査が可能となり、又全国の医療機関でも応用可能となるメリットがある．このため、岐阜大今村教授との共同研究を通じて各中性糖脂質の化学合成を行い、純度の極めて高い各標品を得る事に成功した．
更に、神経学的に健常人の中枢神経内での糖脂質代謝の実態を明らかにするために、正常人脳脊髄液中の中性糖脂質、ステロール代謝物の定量を高感度質量分析計を用いて明らかにした（論文 revised中）．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
体内では、steady-stateに恒常性が保たれている筈のスフィンゴ(糖)脂質含量の異常な増減とそれに伴う自然・獲得免疫の異常活性化が神経疾患で如何に起きるかその機序を追求が本研究の主題である．一方、脂質・糖脂質異常が神経疾患で問題となるアミロイド蛋白、alpha-synuclein等の病因関連蛋白及び種々の受容体蛋白の異常な翻訳後修飾に繋がるか、（糖）脂質類による異常なタンパク修飾が細胞内外への蛋白の異常凝集へと如何に翻訳され得るのかを解明する．中性糖脂質は実は 「神経炎症」という観点では想像以上に重大な役割を担っている可能性がクローズアップされている．我々は、既にこうした可能性を想定し、実際の神経疾患患者でのデータを蓄積してきた．特に、EMRN患者でLacCer
分子の挙動や抗LacCer抗体の細胞生物学的影響、免疫学的作用に関する未発表のデータを含め多くの知見を蓄積してきた．
本研究では、先ずEMRNに着目し、我々が2014年に発見したEMRNの特異的な自己抗体である抗中性糖脂質抗体について、測定法の改良を試みた．従来抗体測定法としてはFar-Eastern blot法を用いてきたが、この方法は手間・コスト・時間が掛かってしまう短所があり、こうした短所を克服するため、高純度抗原分子（中性糖脂質）を用いたELISA法の開発に取り組んだ．ELISA法では、短時間に多数の検体の検査が可能となり、又全国の医療機関でも応用可能となるメリットがある．このため、岐阜大今村教授との共同研究を通じて各中性糖脂質の化学合成を行い、純度の極めて高い各標品を得る事にせいこうした．
更に、患者ではなく正常人の各糖脂質代謝の実態を解明する脳脊髄液（CSF)中のそれらを高感度質量分析計で測定し、各糖脂質類の正常レベルを見出した（論文Revised中）．
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| Strategy for Future Research Activity |
本研究では、1) AD, PD患者試料(血 清・髄液・剖検脳・剖検筋)中の脂質・糖脂質 代謝異常の実態解明、2) 各疾患患者試料中の抗糖脂質抗体のスクリーニングと自然免疫・獲得免疫両免疫系の異常実態の解明、3) 各試料中の原因蛋白 の脂質・糖脂質による翻訳後修飾の実態解明とその蛋白化学的な影響の解明、4) DAMPsやPAMPs の受容体としても機能する膜ラフト機能異常が免疫異常のベースになっているか否かの実態を疾患で検証する．脂質類による蛋白修飾については、その解析法には熟知しており(PNAS 1995)、こうしたexpertise のもとに 展開される本研究は、これら疾患の病因・病態を考える上で極めて重要な知見をもたらす．一方、我々は、認知症と広く神経系が障害されるEMRN患者試料中に種々の中性糖脂質に対する自己抗体を発見し、その抗体価が病勢と相関することから、これら疾患のバイオマーカになり得る事、又これら中性糖脂質が「神経炎症反応」へのシグナル伝達分子になる事を世界で初めて報告した．国内外より抗体検索のため多数の検体が我々のラボに送られて来ている．抗体陽性検体の所有数は世界最多で、こうした抗体が本研究では特に組織化学的な検討やwestern blot法によるシグナル解析などに有効に利用する予定である．更に神経系細胞及びグリア細胞の培養系にこうした抗体を作用させた時の細胞防御及び細胞死への細胞内シグナル伝達系に及ぼす影響を細胞生物学的・神経化学的に詳細に調べる．又、抗中性糖脂質抗体のELISAによる測定法を確立し、多数の検体のその抗体の存否を明らかにし、各疾患での本抗体の病因への関与の実態を明らかにしたい．
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