| Project/Area Number |
24K12465
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56030:Urology-related
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
稲垣 裕介 大阪大学, 大学院医学系研究科, 招へい教員 (80804400)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
福原 慎一郎 大阪大学, 大学院医学系研究科, 招へい准教授 (20609870)
辻村 剛 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (20964406)
上田 倫央 大阪大学, 大学院医学系研究科, 助教 (40759528)
今中 岳洋 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (40909652)
竹澤 健太郎 大阪大学, 大学院医学系研究科, 助教 (90648015)
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| Project Period (FY) |
2024-04-01 – 2027-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥4,420,000 (Direct Cost: ¥3,400,000、Indirect Cost: ¥1,020,000)
Fiscal Year 2026: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2025: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
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| Keywords | 男性不妊 |
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| Outline of Research at the Start |
精索静脈瘤は男性不妊の原因のなかで最も頻度が高いにもかかわらず精液所見悪化を来す詳細な機序は解明されていない。精子は精巣で作られ精巣上体で成熟し、運動能、受精能を獲得するが、その機序はほとんど解明されていない。本研究は精索静脈瘤ラットを用いて精索静脈瘤による精子成熟障害の機序を解明することで、いまだ解明されていない精巣上体での精子成熟機構のメカニズムの解明と、精子成熟障害による男性不妊の診断マーカー及び新規治療法の開発を目指す。
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまでの研究でも我々が使用してきた、精索静脈瘤ラットモデルを用いて実験を進めた。このモデルでは精子運動率の低下が引き起こされ、精子の酸化ストレスやDNAの断片化が増加することがわかっている。
精索静脈瘤群、シリコン成分剤を摂取した精索静脈瘤群、コントロール群（sham）の左精巣上体及び左精巣上体内の精子を採取した。実験の精度を高めより正確な解析をできるようにするため、精巣上体の頭部、体部、尾部の境界をこれまでの実験より、より明確に設定しサンプル採取を行う事とした。また、精巣上体管内の管腔液の内容をより正確に解析するため、管腔内容液の採取方法、異物の除去方法についても検討をしているが、これについてはまだ適切な手法を検討中である。
最終的には精子成熟障害の原因となりうる候補遺伝子を抽出し、その遺伝子のノックアウトマウスを作成することも予定しており、その観点からもラットモデルではなくマウスモデルでの実験系の確立がより有用ではないかと考えてきた。今回マウスを用いて精索静脈瘤モデルの作成を試みた。しかし、体型が小さいことにより解剖学的な構造の同定が難しいことや、ラットで作成する場合より、より細かな操作が必要とされることになり、再現性のある手術手技を確立することは極めて困難であった。これらの結果から、ラットモデルと同様の実験を行うことは難しいと判断し、マウスでの精索静脈瘤モデルの作成は見送ることとした。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
より厳密な基準により検体を分類・回収することが、精巣上体の各部位での成熟メカニズムを明確にできると考えており、一部検討中の手法もあるが、今回の実験過程はおおむねその方針に即した内容で行うことができた。
ノックアウトマウスの作成を念頭にマウスモデルの確立を目指したが難しく、結果としてこれまで通りラットモデルで行うことが手技の安定性という点から優れていることがわかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
マウスモデルについては新たなアイデアが出るようであれば再検討もするが、基本的にはラットモデルでの実験を進める。
精索静脈瘤により影響を受けやすい精巣上体の部位の同定、シリコン成分剤の摂取により発生した水素が精子運動率、受精率を改善させている作用機序について明らかにする。
精子頭部表面タンパクの発現状況の分析、それらのタンパクが酵素により分解されていく状況の把握を行う。精子成熟との関係性を各部位のサンプルを用いて明らかにするとともに、受精能に関連する新たな精子表面タンパクの同定を試みる。また各群での変化を各種解析法により解析し、引き続き精索静脈瘤による精子成熟機序に関連する可能性のある遺伝子群の同定を試みる。
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