| Project/Area Number |
24K12529
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56040:Obstetrics and gynecology-related
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
小屋 美博 名古屋大学, 医学系研究科, 客員研究者 (80396960)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
梶山 広明 名古屋大学, 医学系研究科, 教授 (00345886)
吉原 雅人 名古屋大学, 医学部附属病院, 病院助教 (00878374)
富田 弘之 岐阜大学, 大学院医学系研究科, 准教授 (50509510)
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| Project Period (FY) |
2024-04-01 – 2027-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2026: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2025: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
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| Keywords | 卵巣癌 / 好中球 / 腫瘍微小環境 / 抗腫瘍免疫 |
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| Outline of Research at the Start |
腹膜播種を伴う進行卵巣癌に対する有効な治療法は未だに確立されていない。そのため腫瘍の病勢を制御することで難治性を打破する新たな治療戦略が期待される。卵巣癌において末梢血中の好中球が高値であると予後不良であるという報告や、好中球には多様な機能や表現型が見られるという報告が存在することから、卵巣癌関連好中球（ovarian cancer-associated neutrophils: OCANs）が存在する可能性に注目し、本研究では、卵巣癌細胞と好中球との関係性に着目し、癌微小環境中のOCANsの特徴を明らかにし、それが癌進展へどのように寄与するのかを解明する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
卵巣癌において、末梢血中の好中球が高値であると予後不良という報告が散見されるが、詳細な解析やその機序に関しては明らかになっていない。本研究では、卵巣癌細胞と好中球の関係に着目し、がん微小環境中のがん関連好中球の特徴を明らかにし、がんの進展へ寄与する機序を解明することを目的とする。(1) 好中球の卵巣癌播種形成、予後への影響の評価、(2) 好中球の卵巣癌腹膜播種への影響の解析、(3) 好中球に生じる変化の解析を計画している。令和6年度は、(1)及び(3)を中心に遂行した。腹膜転移における好中球浸潤と予後との関連等の解析、及び免疫正常マウスへの同系卵巣がん細胞移入モデル（同系腹膜播種モデル）を用いた解析を実施した。組織学的に高悪性度の漿液性がんである原発性および転移性進行卵巣がんから得た検体の免疫組織化学染色等を行った。その結果、播種性病変への好中球浸潤は予後に大きな影響を与えることを示唆する結果が得られた。免疫正常マウスへ緑色蛍光たんぱくを発現する同系卵巣がん細胞ID8-ZsGreenを腹腔内投与し、一週間後に腹腔内洗浄を行い、腹腔内に存在する細胞群を回収した。この細胞群から好中球（Ly6G陽性細胞）をセルソーターにより分取した。分取した好中球からRNAを抽出、cDNAを合成しリアルタイムPCRによる解析を行った。その結果、一部の免疫活性化分子において発現の減少、及び免疫抑制化分子に関わる分子に発現の増加が観察された。マウスモデルの結果から、がん関連好中球は宿主の抗腫瘍免疫の減弱させることにより、がんの進展に寄与している可能性が示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
臨床検体を用いた解析は順調に進行。一方、マウスを用いた解析は実験系の構築に手間取り、進行がやや遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後、(2)好中球の卵巣癌腹膜播種への影響し、(3)好中球に生じる変化の解析を中心に課題を遂行する。(1)好中球の卵巣癌播種形成、予後への影響の評価に関しても補完の解析を進める。
(2)マウスにおいて、好中球が欠失した状態を誘導する。次いで、卵巣癌腹膜播種モデルにおいて種々のタイミングにおいて好中球を欠失させることにより、腹膜播種へ及ぼす影響や、好中球が腹膜播種形成に関わる時期を検討する。播種巣及び腹水中のスフェロイドを回収し、免疫組織化学染色用のサンプルを作製し、IHC解析を行う。
(3)腫瘍微小環境に局在している好中球における変化を調べるために、同系腹膜播種モデルより回収した組織・細胞から、セルソーターにより好中球を分取する。腹膜播種モデル（担癌）由来と正常マウス（非担癌）由来の好中球を用いて、オミクス解析を実施し、どのような変化を生じているかを解析する。更に卵巣癌関連好中球のマーカーとなりうる分子の同定を試みる。
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