CpGDNA配列に着目した非結核性抗酸菌症の病態解明と新規治療法の開発

• Project/Area Number: 25461145
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Research Field: Respiratory organ internal medicine
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 榊原 智博 東北大学, 大学病院, 助教 (80422111)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 菊地 利明 東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (10280926)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2014-03-31
• Project Status: Discontinued (Fiscal Year 2013)
• Budget Amount: ¥5,070,000 (Direct Cost: ¥3,900,000、Indirect Cost: ¥1,170,000); Fiscal Year 2015: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000); Fiscal Year 2014: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000); Fiscal Year 2013: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
• Keywords: 非結核性抗酸菌症 / CpG-DNA / TLR9

Research Abstract

非結核性抗酸菌症（NTM症）は原因菌が同一であっても、その病態、病状の進行度は個々の患者で大きく異なる。NTM症はその進行度と、主な原因菌であるMycobacterium avium菌株の遺伝子型に関連があることが報告されており、またNTM症のうち過敏性肺臓炎様の疾患であるHot tub lungはToll様受容体（TLR）９が関与していることも示されている。一方乳酸菌では菌株間でゲノム内のCpGDNA（TLR9のリガンド）配列に相違があり、宿主への免疫刺激性が異なることが知られている。よって本研究はavium菌株間のゲノム上に存在するTLR9のリガンドであるCpGDNA配列に着目し、菌株間でのCpGDNA配列の相違、免疫刺激性の相違を明らかにし、さらにNTM症の病態解明、新規治療法の開発を目的とした。
まず患者の喀痰検体から分離培養し保存したMycobacterium avium菌（Hot tub lung患者から分離した菌株を含む）を新たに液体培地で培養し、増殖したのちに遠心分離し、そのゲノムDNAを精製した。精製したDNAは制限酵素Sau3AIで消化、断片化してエタノール沈殿方法で再度精製を行った。次に採血した全血からヒト末梢血単核球を分離培養し、その培養上清中に、上記の方法で精製したMycobacterium avium菌のゲノムDNAを加えて、２４時間培養した。その後培養上清を採取し、ELISA法でIFN-アルファを測定した。その結果Mycobacterium aviumの菌株間でゲノムDNAのよる免疫細胞の刺激性に相違は認めなかった。またTLR9を発現しているヒト形質細胞様樹状細胞の細胞株であるPMDC05を用いて同様の実験を行ったが、同様にMycobacterium aviumの菌株間でゲノムDNAのよる免疫細胞の刺激性に相違は認めなかった。

Research Products

• [Journal Article] Randomized Phase II Trial Comparing Carboplatin Plus Weekly Paclitaxel and Docetaxel Alone in Elderly Patients With Advanced Non-Small Cell Lung Cancer: North Japan Lung Cancer Group Trial 0801 (2014)
  • Author(s): Maemondo M, Inoue A, Sugawara S, Harada T, Minegishi Y, Usui K, Miwa K, Morikawa N, Kambe M, Ube K, Watanabe K, Ishimoto O, Sakakibara T, Gemma A, Nukiwa T
  • Journal Title: Oncologist Volume: 19 Issue: 4 Pages: 352-353
  • DOI: 10.1634/theoncologist.2013-0411
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] An effective enrichment strategy for EML4-ALK fusion gene screening in patients with non-small cell lung cancer. (2013)
  • Author(s): Kobayashi M, Sakakibara T, Inoue A, Fukuhara T, Sasano H, Ichinose M, Nukiwa T.
  • Journal Title: Respir Investig Volume: ５２ Issue: 1 Pages: 49-56
  • DOI: 10.1016/j.resinv.2013.06.003
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Randomized phase II trial of uracil/tegafur and cisplatin versusvinorelbine and cisplatin with concurrent thoracic radiotherapy for locally advanced unresectable stage III non-small-cell lung cancer:NJLCG 0601 (2013)
  • Author(s): Sugawara S, Maemondo M, Tachihara M, Inoue A, Ishimoto O, Sakakibara T, 全14名中6番目
  • Journal Title: Lung Cancer Volume: ８１ Issue: 1 Pages: 1-1
  • DOI: 10.1016/j.lungcan.2013.04.010
  • Peer Reviewed
• [Presentation] EGFR遺伝子変異を伴う家族性肺腺癌患者におけるエクソーム解析 (2013)
  • Author(s): 東出直樹、菊地利明、榊原智博、齋藤良太、光石陽一郎、大河内眞也、井上彰、一ノ瀬正和
  • Organizer: 第７２回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜