自然免疫反応増強のメカニズム解析と臨床応用

• Project/Area Number: 25461949
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Research Field: General surgery
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 徳本 憲昭 広島大学, 大学病院, 病院助教 (90564980)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 田邊 和照 広島大学, 医歯薬保健学研究院, 講師 (40379847)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2014-03-31
• Project Status: Discontinued (Fiscal Year 2013)
• Budget Amount: ¥4,940,000 (Direct Cost: ¥3,800,000、Indirect Cost: ¥1,140,000); Fiscal Year 2015: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000); Fiscal Year 2014: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000); Fiscal Year 2013: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
• Keywords: NK細胞 / TRAIL / HSP70 / 絶食刺激 / exosome / 自然免疫能増強

Research Abstract

NK細胞が免疫反応や抗腫瘍効果に重要な役割を果たしていることは周知の事実である。平成22年度科学研究費による研究において、絶食条件がNK細胞のフェノタイプ変化を引き起こし、TRAILを介した自然免疫能増強を引き起こす可能性をマウスの実験により示した。本研究は絶食によるNK細胞活性増強のメカニズムを解明し、その調節因子を明らかとすることによりNK細胞を中心とした自然免疫を制御し、周術期感染管理や腫瘍免疫に応用することが目的である。
Heat Shock Protein (HSP) 70とNK細胞活性変化の検討
B6マウスでは絶食により肝内リンパ球分画が変化し、NK細胞のTRAIL発現フェノタイプ変化が起こることを明らかとした。また肝組織から抽出した蛋白のWestern Blot解析からHSP70がNK細胞活性増強因子として作用している可能性が示唆された。
i）細胞傷害性試験
絶食マウス肝還流リンパ球を用いYAC-1、Hepa1-6をターゲットとした細胞傷害性試験を行い、絶食刺激がNK細胞のTRAILを介した細胞傷害性が亢進することを確認した。　　　ii）HSP70(rHSP70)が摂食マウス肝還流リンパ球に与える影響の確認　　　　　　　　　摂食マウス肝還流リンパ球をrHSP70添加下に培養し、フローサイトメトリー行いフェノタイプを確認した。rHSP70添加ではNK細胞のフェノタイプ変化は引き起こせなかった。可溶性HSP70はNK細胞に影響を与えることが出来ず、HSP70を含有するexosomeが関与する可能性が考えられた。
今後、肝組織よりexosome抽出しHSP70が含まれていること、ならびに絶食刺激により増強することを示す予定である。また絶食刺激下の肝組織由来exosome（HSP70多い）とNK細胞を培養することにより、NK細胞のフェノタイプ変化、細胞傷害性を検討する予定である。