生活習慣の予防を目的とした効率的な食品由来AGEs生成阻害化合物の探索

• Project/Area Number: 25750056
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Research Field: Eating habits
• Research Institution: Tokai University
• Principal Investigator: 白河 潤一 東海大学, 農学部, 特定研究員 (00647654)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2015-03-31
• Project Status: Discontinued (Fiscal Year 2014)
• Budget Amount: ¥3,770,000 (Direct Cost: ¥2,900,000、Indirect Cost: ¥870,000); Fiscal Year 2015: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2014: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2013: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
• Keywords: AGEs生成抑制 / 植物成分抽出 / ELISA法

Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的であるAGEs生成阻害剤の探索として、前年度に続き、植物抽出物のEnzyme-Linked ImmunoSorbent Assay（ELISA）法によるAGEs生成抑制効果の検証を行った。前年度AGEs生成抑制効果が認められたモウセンゴケ属（Drosera）と近縁の分類群であるルリマツリ（Pulumbago auriculata）および、日常的に食されている野菜や民間療法的に利用されてきた野草等、計11種の植物についてエタノール、アセトンおよび熱湯抽出を行い、それぞれの抽出物を得た。これらの抽出物のAGEs生成抑制効果を、Nω-carboxy(methyl)arginine（CMA）およびNε-(carboxymethyl)lysine（CML）に対する特異的モノクローナル抗体を用いたELISA法によって検証した。
その結果、BSAとリボース混合液を1週間37℃でインキュベートし、糖化反応を進行させた条件下において、それぞれの抽出物を0.01 mg/ml の濃度で添加すると、ゲンノショウコ（Geranium thunbergii）の抽出物添加群でCMAおよびCML生成量が無添加群に比べ有意に低下した。本結果から、これらの植物抽出物がCMAおよびCMLの生成を抑制することが明らかとなり、AGEs生成阻害剤として利用できる可能性が示された。また、生体中におけるAGEs検出のための液体クロマトグラフィー・タンデム質量分析（LC-MS/MS）および高速液体クロマトグラフィー（HPLC）による測定系の確立を行い、血清中において6種のAGEsの定量が可能となった。

Research Products

• [Journal Article] Detection of AGEs as markers for carbohydrate metabolism and protein denaturation (2014)
  • Author(s): Nagai R, Shirakawa J, Fujiwara Y, Ohno R, Moroishi N, Sakata N, Nagai M.
  • Journal Title: Journal of Clinical Biochemistry and Nutrition Volume: 55 Issue: 1 Pages: 1-6
  • DOI: 10.3164/jcbn.13-112
  • NAID: 130004466757
  • ISSN: 0912-0009, 1880-5086
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Inhibition of AGEs formation by natural products. Amino Acids. (2013)
  • Author(s): Nagai R, Shirakawa JI, Ohno RI, Moroishi N, Nagai M.
  • Journal Title: Amino Acids Volume: (in press) Issue: 2 Pages: 261-266
  • DOI: 10.1007/s00726-013-1487-z
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 代謝異常の評価を目的とした生体中AGEsの測定 (2014)
  • Author(s): 白河潤一、松村剛、木下博之、荒木栄一、伊藤健二、坂田則行、永井竜児
  • Organizer: 第24回日本メイラード学会学術集会
  • Place of Presentation: 熊本市国際交流会館（熊本）
  • Year and Date: 2014-11-07 – 2014-11-08
• [Presentation] 糖尿病および糖尿病性腎症における血清中AGEs量の変化 (2014)
  • Author(s): 白河潤一、松村剛、木下博之、荒木栄一、伊藤健二、坂田則行、永井竜児
  • Organizer: 第29回日本糖尿病合併症学会
  • Place of Presentation: 都市センターホテル（東京）
  • Year and Date: 2014-10-03 – 2014-10-04
• [Presentation] 代謝異常の評価を目的としたAGEsの検出 (2014)
  • Author(s): 白河潤一、松村剛、木下博之、荒木栄一、伊藤健二、坂田則行、永井竜児
  • Organizer: レドックス・ライフイノベーション第170委員会
  • Place of Presentation: シーガイアコンベンションセンター（宮崎）
  • Year and Date: 2014-08-21 – 2014-08-23
• [Presentation] 脂肪細胞の新規ストレスマーカーである2SCの測定系の確立
  • Author(s): 永井竜児、白河潤一、品川雅敏、多々良友博、有富美貴、佐藤瑛記、永井美芽、大和田滋
  • Organizer: 第86回日本生化学会大会
  • Place of Presentation: 神奈川県横浜市パシフィコ横浜
• [Presentation] Prevention of lifestyle-related diseases with natural compounds derived AGEs inhibitors
  • Author(s): Nagai R, Ohno R, Moroishi N, Shirakawa J, Nagai M.
  • Organizer: 第17 回アジア農業シンポジウム
  • Place of Presentation: 熊本県熊本市東海大学熊本キャンパス