線溶因子を介したVitronectinプロセッシング制御と細胞死制御機構の解明

• Project/Area Number: 25861143
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Research Field: Radiation science
• Research Institution: National Institute of Radiological Sciences
• Principal Investigator: 羽澤 勝治 独立行政法人放射線医学総合研究所, 緊急被ばく医療研究センター, 博士研究員 (40622460)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2014-03-31
• Project Status: Discontinued (Fiscal Year 2013)
• Budget Amount: ¥4,030,000 (Direct Cost: ¥3,100,000、Indirect Cost: ¥930,000); Fiscal Year 2014: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000); Fiscal Year 2013: ¥3,250,000 (Direct Cost: ¥2,500,000、Indirect Cost: ¥750,000)
• Keywords: Vitronectin / PAI-1 / プロセッシング / 放射線

Research Abstract

Vitronectin (VN)は主に肝臓で産生される。この時、プロテアーゼ（Furin）による切断（プロセッシング）を受け、2種類のフォーム（全長型VN75・切断型VN75/10）が存在する。このVNフォーム形成過程に対する線溶系因子Plasminogen Activator Inhibitor 1 (PAI-1)の影響を検討し、以下の結果を得た。
ヒト組み換え型たんぱく質を用いた解析から、rVNとrFurinを至適条件下で反応させるとすべてのVNが切断型VN65/10になった。この時、rPAI-1が存在することで、FurinによるVNのプロセッシングは阻害された。また、大腸菌発現系で精製した野生型rPAI-1WT及びVNとの結合性が弱い変異型rPAI-1MTについて検討すると、rPAI-1MTはrPAI-1WTに比べてrVNプロセッシング阻害効果は弱かった。
VN及びPAI-1遺伝子をHEK293細胞に共発現させると、VN遺伝子単独発現に比べVNのプロセッシングは強く抑制された。この時、共発現した細胞では全長型VN75が細胞外（培養液中）に放出されていた。さらに、共発現細胞では細胞内及び養液中のVNはPAI-1と複合体を形成していた。
放射線被ばくした肝臓由来癌細胞HepG2はPAI-1の上昇、及びVNプロセッシングの抑制が認められた。放射線照射後のHUVECに対する生存支持効果はrVN（全長型VN75・切断型VN75/10）とrFurinで処理した切断型VN75/10を比較すると、rVNは切断型VN65/10よりも強い活性を示した。
以上のことから、組織傷害時に誘導されるPAI-1はVNと結合し、FurinによるVNプロセッシングを抑制し、細胞死抑制効果の高い全長型VN75の放出を制御していることが明らかになった。

Research Products

• [Presentation] 線溶因子を介したVitronectinプロセッシング制御と細胞死制御機構の解明」 (2013)
  • Author(s): 羽澤 勝治
  • Organizer: 第56回放射線影響学会
  • Place of Presentation: 青森県青森市ホテルクラウンパレス青森