Establishment of tick cell line and survey for tick-borne viruses in Japan

• Project/Area Number: 25893151
• Research Category: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Parasitology (including sanitary zoology)
• Research Institution: Yamaguchi University
• Principal Investigator: KUWATA Ryusei 山口大学, 理工学研究科, 研究員 (00711219)
• Project Period (FY): 2013-08-30 – 2015-03-31
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2014)
• Budget Amount: ¥2,210,000 (Direct Cost: ¥1,700,000、Indirect Cost: ¥510,000); Fiscal Year 2014: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2013: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000)
• Keywords: マダニ / 培養細胞 / ウイルス / 感染症 / 媒介節足動物 / 蚊 / 衛生害虫

Outline of Final Research Achievements

In this study, I conducted to ① establish of tick cell line and ② survey for tick-borne viruses in Japan.
① I temporary cultured of the cells from the tissue of Amblyomma testudinarium in VP-12 medium with 15% FBS and 15% TPB. However, these cells were flowed because of the weak attachment to the bottom of culture dish. Now I tried to culture again with the same condition on ploy-L-lysine-coated dishes.
② We collected ticks at several sites of Japan, mainly Yamaguchi prefecture, by tick flagging technique or ticks parasitizing the wild animals. Collected ticks were identified and used for virus isolation or detection of viral gene. As a result, we successfully detected viral genes of undescribed species from RNA extraction of ticks collected in several place of Japan. Now we analyzed the characteristics of these virus species.

Research Products

• [Journal Article] Establishment and characterization of two new cell lines from the mosquito Armigeres subalbatus (Coquillett) (Diptera: Culicidae) (2015)
  • Author(s): Hoshino K., Isawa H., Kuwata R., Tajima S., Takasaki T., Iwabuchi K., Sawabe K., Kobayashi M., Sasaki T.
  • Journal Title: In Vitro Cellular & Developmental Biology - Animal Volume: 12 Mar Issue: 7 Pages: 00-00
  • DOI: 10.1007/s11626-015-9883-1
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Analysis of mosquito-borne flavivirus superinfection in Culex tritaeniorhynchus cells persistently infected with Culex flavivirus. (2015)
  • Author(s): Kuwata R, Isawa H, Hoshino K, Sasaki T, Kobayashi M, Maeda K, Sawabe K
  • Journal Title: Journal of Medical Entomology Volume: 52 Issue: 2 Pages: 222-229
  • DOI: 10.1093/jme/tju059
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Heterogeneity of the large subunit of ribosomal RNA gene sequences in a Halicephalobus gingivalis isolate. (2014)
  • Author(s): Yoshiga T, Kuwata R, Takai H, Nishimura K
  • Journal Title: Nematology Volume: 16 Pages: 1233-1236
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Emergence of pathogenic coronaviruses in cats by homologous recombination between feline and canine coronaviruses. (2014)
  • Author(s): Terada Y, Matsui N, Noguchi K, Kuwata R, Shimoda H, Soma T, Mochizuki M, Maeda K
  • Journal Title: PLoS One Volume: 9 Issue: 9 Pages: e106534-e106534
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0106534
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] First isolation and characterization of a mosquito-borne orbivirus belonging to the species Umatilla virus in East Asia. (2014)
  • Author(s): Ejiri H, Kuwata R, Tsuda Y, Sasaki T, Kobayashi M, Sato Y, Sawabe K, Isawa H.
  • Journal Title: Arch Virol. Volume: 159 Issue: 10 Pages: 2675-2685
  • DOI: 10.1007/s00705-014-2117-0
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Seroprevalence of Japanese encephalitis virus infection in captive Japanese macaques (Macaca fuscata). (2014)
  • Author(s): Shimoda H, Saito A, Noguchi K, Terada Y, Kuwata R, Akari H, Takasaki T, Maeda K
  • Journal Title: Primates Volume: 55 Issue: 3 Pages: 441-445
  • DOI: 10.1007/s10329-014-0421-7
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] 蚊が保有・媒介するウイルス感染症 (2014)
  • Author(s): 鍬田龍星，杉山弘樹，下田宙，前田健
  • Journal Title: 日本獣医寄生虫学会誌 Volume: 13 Pages: 91-101
• [Journal Article] 日本脳炎媒介蚊コガタアカイエカが保有・媒介するウイルス (2014)
  • Author(s): 鍬田龍星
  • Journal Title: 日本衛生動物学会 Volume: 65(1) Pages: 1-11
  • NAID: 130004714255
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Surveillance of Japanese encephalitis virus infection in mosquitoes in Vietnam from 2006 to 2008. (2013)
  • Author(s): Kuwata R. Nga P.T., Yen N.T., Hoshino K., Isawa H., Higa Y., Hoang N.V., Trang B.M., Loan D.P., Phong T.V., Sasaki T., Tsuda Y., Kobayashi M., Sawabe K., Takagi M
  • Journal Title: Am. J. Trop. Med. Hyg. Volume: 88 Issue: 4 Pages: 681-688
  • DOI: 10.4269/ajtmh.12-0407
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Dak Nong virus, a novel insect nidovirus isolated from Culex mosquitoes in Vietnam (2013)
  • Author(s): Kuwata R., Satoh T., Isawa H., Yen N.T., Phong T.V., Nga P.T., Kurashige T., Hiramatsu Y., Fukumitsu Y., Hoshino K., Sasaki T., Kobayashi M., Mizutani T., Sawabe K
  • Journal Title: Arch. Virol Volume: 158(in press) Issue: 11 Pages: 2273-84
  • DOI: 10.1007/s00705-013-1741-4
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] マダニが保有・媒介するウイルス感染症 (2013)
  • Author(s): 鍬田龍星、高野愛、下田宙、前田健
  • Journal Title: 獣医寄生虫学会誌 Volume: 12(1) Pages: 32-43
• [Presentation] 蚊より分離されたRNAウイルスについて (2014)
  • Author(s): 鍬田龍星，杉山弘樹，濵﨑千菜美，南昌平，鈴木絢子，服部志保， 米満研三，寺田豊，野口慧多，下田宙，前田健
  • Organizer: 第62回 日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜(横浜市）
  • Year and Date: 2014-11-10 – 2014-11-12
• [Presentation] SFTSウイルスの生活環における動物の重要性 (2014)
  • Author(s): 前田健，濱崎千菜美，下田宙，鍬田龍星，野口慧多，米満研三，高野愛，鈴木和男，森川茂
  • Organizer: 第62回 日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜(横浜市）
  • Year and Date: 2014-11-10 – 2014-11-12
• [Presentation] 致死性猫コロナウイルス流行の分子疫学調査 (2014)
  • Author(s): 寺田豊，堀小郁，相馬武久，Van Dung Nguyen，野口慧多，鍬田龍星，下田宙，宇根有美，前田健
  • Organizer: 第62回 日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜
  • Year and Date: 2014-11-10 – 2014-11-12
• [Presentation] 牛舎捕集蚊の消長と分離ウイルスについて (2014)
  • Author(s): 鍬田龍星，杉山弘樹，濵﨑千菜美，南昌平，鈴木絢子，服部志保， 米満研三，寺田豊，野口慧多，下田宙，前田健
  • Organizer: 第21回 トガ・フラビ・ペスチウイルス研究会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜(横浜市）
  • Year and Date: 2014-11-09
• [Presentation] 野生動物、ダニからフラビウイルス遺伝子検出 (2014)
  • Author(s): 米満研三，下田宙，鍬田龍星，寺田豊，高野愛，前田健
  • Organizer: 第21回 トガ・フラビ・ペスチウイルス研究会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜(横浜市）
  • Year and Date: 2014-11-09
• [Presentation] 日本脳炎ウイルスの細胞馴化に伴う遺伝子変異について (2014)
  • Author(s): 鍬田龍星，竹之内惇，木村菜穂，寺田豊，野口慧多，白藤浩明，下島昌幸，下田宙，前田健
  • Organizer: 第157回 日本獣医学会 学術集会
  • Place of Presentation: 北海道大学（北海道）
  • Year and Date: 2014-09-09 – 2014-09-12
• [Presentation] 国内捕集蚊およびマダニ由来のオルビウイルス (2014)
  • Author(s): 江尻寛子，鍬田龍星，伊澤晴彦，林昌宏，山口幸恵，伊藤睦代， 高崎智彦，小滝徹，佐々木年則，津田良夫，林利彦，小林睦生，西條政幸，沢辺京子
  • Organizer: 第157回 日本獣医学会 学術集会
  • Place of Presentation: 北海道大学（北海道）
  • Year and Date: 2014-09-09 – 2014-09-12
• [Presentation] 野生動物におけるSFTSウイルス感染の疫学調査 (2014)
  • Author(s): 浜崎千菜美，鍬田龍星，野口慧多，寺田豊，下田宙，高野愛，鈴木和男，森川茂，前田健
  • Organizer: 第157回 日本獣医学会 学術集会
  • Place of Presentation: 北海道大学（北海道）
  • Year and Date: 2014-09-09 – 2014-09-12
• [Presentation] 国内の野生動物およびダニから新規フラビウイルスの検出 (2014)
  • Author(s): 下田宙，米満研三，早坂大輔，好井健太朗，寺田豊，野口慧多， 鍬田龍星，高野愛，前田健
  • Organizer: 第157回 日本獣医学会 学術集会
  • Place of Presentation: 北海道大学（北海道）
  • Year and Date: 2014-09-09 – 2014-09-12
• [Presentation] 山口捕集蚊より分離されたウイルスの性状解析 (2014)
  • Author(s): 鍬田龍星，杉山弘樹，濵﨑千菜美，南昌平，鈴木絢子，服部志保， 米満研三，寺田豊，野口慧多，下田宙，前田健
  • Organizer: 第29回 中国四国ウイルス研究会
  • Place of Presentation: 山口大学（山口市）
  • Year and Date: 2014-06-28 – 2014-06-29
• [Presentation] 野生動物におけるSFTSウイルス感染の拡大傾向 (2014)
  • Author(s): 浜崎千菜美，鍬田龍星，野口慧多，寺田豊，下田宙，高野愛，鈴木和男，森川茂，前田健
  • Organizer: 第29回 中国四国ウイルス研究会
  • Place of Presentation: 山口大学（山口市）
  • Year and Date: 2014-06-28 – 2014-06-29
• [Presentation] スンクスからの新規コロナウイルスの検出 (2014)
  • Author(s): 寺田豊，下田宙，野口慧多，Nguyen Van Dung，鍬田龍星，高野愛， 本道栄一，前田健
  • Organizer: 第29回 中国四国ウイルス研究会
  • Place of Presentation: 山口大学（山口市）
  • Year and Date: 2014-06-28 – 2014-06-29
• [Presentation] 牛舎の蚊からのウイルス検出について (2014)
  • Author(s): 鍬田龍星，竹之内惇，米満研三，服部志保，鈴木絢子，南昌平，濵﨑千菜美，野口慧多，寺田豊，下田宙，藤島政博，前田健
  • Organizer: 第49回 日本脳炎ウイルス生態学研究会
  • Place of Presentation: ホテルニュータナカ（山口市）
  • Year and Date: 2014-05-16 – 2014-05-17
• [Presentation] 野生動物におけるSFTSウイルス感染の疫学調査 (2014)
  • Author(s): 浜崎千菜美，鍬田龍星，野口慧多，寺田豊，下田宙，高野愛，鈴木和男，森川茂，前田健
  • Organizer: 第49回 日本脳炎ウイルス生態学研究会
  • Place of Presentation: ホテルニュータナカ（山口市）
  • Year and Date: 2014-05-16 – 2014-05-17
• [Presentation] 国内で捕集された蚊およびマダニから分離されたオルビウイルスの性状解析 (2014)
  • Author(s): 江尻寛子，鍬田龍星，伊澤晴彦，佐々木年則，津田良夫，林利彦，小滝徹，高崎智彦，小林睦生，沢辺京子
  • Organizer: 第49回 日本脳炎ウイルス生態学研究会
  • Place of Presentation: ホテルニュータナカ（山口市）
  • Year and Date: 2014-05-16 – 2014-05-17
• [Presentation] 海外飛来コガタアカイエカ調査及びミトコンドリアDNA COI遺伝子の制限酵素切断パターンによる鑑別 (2014)
  • Author(s): 大迫英夫，吉岡健太，鍬田龍星，沢辺京子，原田誠也
  • Organizer: 第49回 日本脳炎ウイルス生態学研究会
  • Place of Presentation: ホテルニュータナカ（山口市）
  • Year and Date: 2014-05-16 – 2014-05-17
• [Presentation] マダニ相に関する国内調査 (2014)
  • Author(s): 沢辺京子，山内健生，橋本知幸，野田伸一，渡辺護，鍬田龍星，前田健，佐藤智美，前川芳秀，林利彦，小林睦生
  • Organizer: 第49回 日本脳炎ウイルス生態学研究会
  • Place of Presentation: ホテルニュータナカ（山口市）
  • Year and Date: 2014-05-16 – 2014-05-17
• [Presentation] マダニおよび野生動物におけるSFTSウイルスの感染状況 (2014)
  • Author(s): 鍬田龍星
  • Organizer: 第66回日本衛生動物学会大会
  • Place of Presentation: 岐阜大学（岐阜県岐阜市）
  • Invited
• [Presentation] 牛舎における蚊の消長とウイルス保有状況 (2014)
  • Author(s): 鍬田龍星、竹之内惇、米満研三、服部志保、鈴木絢子、南昌平、濵﨑千菜美、野口慧多、寺田豊、藤島政博、下田宙、前田健
  • Organizer: 第66回日本衛生動物学会大会
  • Place of Presentation: 岐阜大学（岐阜県岐阜市）
• [Presentation] 国内捕集蚊からのオルビウイルスの分離ならびに性状解析 (2014)
  • Author(s): 江尻寛子、伊澤晴彦、津田良夫、鍬田龍星、小林睦生、佐々木年則、佐藤雪太、沢辺京子
  • Organizer: 第66回日本衛生動物学会大会
  • Place of Presentation: 岐阜大学（岐阜県岐阜市）
• [Presentation] ヤブカ属蚊由来培養細胞の樹立の試み (2014)
  • Author(s): 小林大介、伊澤晴彦、鍬田龍星、星野啓太、江尻寛子、佐々木年則、小林睦生、太田伸生、沢辺京子
  • Organizer: 第66回日本衛生動物学会大会
  • Place of Presentation: 岐阜大学（岐阜県岐阜市）
• [Presentation] 2013年晩秋に実施したマダニ相に関する国内調査 (2014)
  • Author(s): 沢辺京子、山内健生、橋本知幸、野田伸一、渡辺護、平林公男、鍬田龍星、前田健、安藤勝彦、鎮西康雄、佐藤智美、前川芳秀、林利彦、小林睦生
  • Organizer: 第66回日本衛生動物学会大会
  • Place of Presentation: 岐阜大学（岐阜県岐阜市）
• [Presentation] 昆虫特異的フラビウイルス Aedes flavivirus の自然界における維持機構 (2014)
  • Author(s): 小林大介、伊澤晴彦、糸川健太郎、鍬田龍星、星野啓太、江尻寛子、佐々木年則、小林睦生、糸山享、太田伸生、沢辺京子
  • Organizer: 第58回日本応用動物昆虫学会大会
  • Place of Presentation: 高知大学（高知県高知市）
• [Presentation] ベトナム捕集蚊より分離された新規ニドウイルスの性状解析 (2013)
  • Author(s): 鍬田龍星、佐藤朝光、伊澤晴彦、Yen, Nguyen Thi、Phong, Tran Vu、Nga, Phan Thi、倉重友和、平松征洋、福光由起、星野啓太、佐々木年則、水谷哲也、前田健、小林睦生、沢辺京子
  • Organizer: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: 神戸国際会議場（兵庫県神戸市）
• [Presentation] 日本脳炎ウイルスの細胞馴化による感染性の変化 (2013)
  • Author(s): 竹之内惇、下田宙、下島昌幸、鍬田龍星、前田 健
  • Organizer: 第20回トガ・フラビ・ペスチウイルス研究会
  • Place of Presentation: 神戸国際会議場（兵庫県神戸市）
• [Presentation] 山口県のイノシシからダニ媒介性脳炎ウイルス様遺伝子の検出 (2013)
  • Author(s): 下田宙、早坂大輔、好井健太郎、米満研三、寺田豊、野口慧多、鍬田龍星、高野愛、前田健
  • Organizer: 第20回トガ・フラビ・ペスチウイルス研究会
  • Place of Presentation: 神戸国際会議場（兵庫県神戸市）
• [Presentation] 昆虫特異的フラビウイルスAedes flavivirus (AEFV)の性状解析ならびに伝播様式の解析
  • Author(s): 小林大介、伊澤晴彦、鍬田龍星、星野啓太、江尻寛子、佐々木年則、小林睦生、糸山享、太田伸生、沢辺京子
  • Organizer: 第65回日本衛生動物学会東日本支部大会
  • Place of Presentation: 川口総合文化センター（埼玉県川口市）