Counting of proteins in a single exosome using total internal reflection fluorometry and active adsorption control

• Project/Area Number: 25K01800
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Review Section: Basic Section 34020:Analytical chemistry-related
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 金田 隆 岡山大学, 環境生命自然科学学域, 教授 (20243909)
• Project Period (FY): 2025-04-01 – 2029-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2025)
• Budget Amount: ¥18,980,000 (Direct Cost: ¥14,600,000、Indirect Cost: ¥4,380,000); Fiscal Year 2028: ¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000); Fiscal Year 2027: ¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000); Fiscal Year 2026: ¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000); Fiscal Year 2025: ¥6,110,000 (Direct Cost: ¥4,700,000、Indirect Cost: ¥1,410,000)
• Keywords: エクソソーム / 全反射蛍光法 / 能動的吸着 / 光圧 / 電気泳動

Outline of Research at the Start

エクソソームは細胞間のコミュニケーション、がん転移に関連し、がんのバイオマーカーとしての利用やその機能解明が期待されている。本研究は、現段階では達成できない単一エクソソームのタンパク質を計数できる方法を開発する。エクソソーム上のマーカータンパク質を蛍光標識し、新しいエクソソーム吸着制御法と全反射蛍光測定法に基づき、単一エクソソーム中のマーカータンパク質の分子数を計測する。この方法を実現するともとに、単一エクソソームの種々のマーカータンパク質を計測し、分子レベルでのエクソソームの多分散性に関する新しい知見を得る。