Pattern analysis of post-translational modification using on-line coupling of immunoadsorption and capillary isoelectric focusing.

• Project/Area Number: 26410158
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Research Field: Analytical chemistry
• Research Institution: Fukushima Medical University
• Principal Investigator: Shimura Kiyohito 福島県立医科大学, 医学部, 教授 (30130008)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 長井 俊彦 福島県立医科大学, 医学部, 助教 (90180447)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2016)
• Budget Amount: ¥5,070,000 (Direct Cost: ¥3,900,000、Indirect Cost: ¥1,170,000); Fiscal Year 2016: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000); Fiscal Year 2015: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000); Fiscal Year 2014: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
• Keywords: electrophoresis / isoelectric focusing / immunoadsorption / PTM / modform analysis / capillary / キャピラリー等電点電気泳動 / 免疫抽出 / 翻訳後修飾体 / モドフォーム分析 / 分離分析 / 抗体カラム / タンパク質 / 翻訳後修飾 / マイクロ分析 / 免疫等電点電気泳動 / 結合分析

Outline of Final Research Achievements

A separation and analysis device that integrates an immunoadsorption column and a capillary for isoelectric focusing was developed. By using this device, an analysis method was developed to elute the sample trapped in the immunoadsorption column into the device and analyze the eluted sample by capillary isoelectric focusing. This method can efficiently separate and determine the charge variants of a protein produced by post-translational modifications.

Research Products

• [Journal Article] Capillary isoelectric focusing after sample enrichment with immunoaffinity chromatography in a single capillar (2016)
  • Author(s): Kiyohito Shimura and Toshihiko Nagai
  • Journal Title: Sci. Rep. Volume: 6 Issue: 1 Pages: 39221-39221
  • DOI: 10.1038/srep39221
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Direct coupling of immobilized metal ion affinity chromatography and capillary isoelectric focusing in a single capillary (2015)
  • Author(s): Shimura K, Nagai T.
  • Journal Title: Journal of Electrophoresis Volume: 59 Issue: 1 Pages: 7-17
  • DOI: 10.2198/jelectroph.59.7
  • NAID: 130005117218
  • ISSN: 1349-9394, 1349-9408
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] 免疫磁気分離とキャピラリー等電点電気泳動の直接結合 (2016)
  • Author(s): 瀬戸善一、福原修一、長井俊彦、志村清仁
  • Organizer: 第36回キャピラリー電気泳動シンポジウム (SCE 2016)
  • Place of Presentation: 徳島市
  • Year and Date: 2016-11-09
• [Presentation] 一体型キャピラリーデバイスを用いたエリスロポエチンの等電点パターン分析 (2016)
  • Author(s): 志村清仁、長井俊彦、瀬戸善一、福原修一、山本雅哉、和栗 聡、永尾雅哉
  • Organizer: 第67回日本電気泳動学会総会
  • Place of Presentation: 釧路市
  • Year and Date: 2016-08-26
• [Presentation] 抗体アフィニティーカラムとキャピラリー等電点電気泳動の直接結合 －第3報 より温和な溶離・陽極液を用いた直接結合分析－ (2016)
  • Author(s): 長井俊彦、志村清仁
  • Organizer: 第67回日本電気泳動学会総会
  • Place of Presentation: 釧路市
  • Year and Date: 2016-08-26
• [Presentation] Direct Coupling of Immunoaffinity Chromatography and Capillary Isoelectric Focusing in a Unified Capillary Device (2016)
  • Author(s): Shimura Kiyohito
  • Organizer: BIT's 8th Annual International Congress of Antibodies-2016
  • Place of Presentation: Dalian
  • Year and Date: 2016-04-25
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] APCEによる組換えエリスロポエチンの等電点パターン決定 (2015)
  • Author(s): 志村清仁、長井俊彦、瀬戸善一、福原修一、山本雅哉、和栗 聡、永尾雅哉
  • Organizer: 第35回キャピラリー電気泳動シンポジウム
  • Place of Presentation: 岡山大学（岡山市）
  • Year and Date: 2015-11-04
• [Presentation] アフィニティークロマトと等電点分離の直接結合に最適なキャピラリー電気泳動装置 (2015)
  • Author(s): 志村清仁
  • Organizer: 第66回日本電気泳動学会総会
  • Place of Presentation: 東京工科大学（東京都大田区）
  • Year and Date: 2015-09-04
• [Presentation] 抗体アフィニティーカラムとキャピラリー等電点電気泳動の直接結合 (2015)
  • Author(s): 長井俊彦、志村清仁
  • Organizer: 第66回日本電気泳動学会総会
  • Place of Presentation: 東京工科大学（東京都大田区）
  • Year and Date: 2015-09-04
• [Presentation] アフィニティークロマトグラフィーと等電点電気泳動の直接結合に最適な電気泳動装置 (2014)
  • Author(s): 志村清仁、長井俊彦、瀬戸善一、福原修一
  • Organizer: 第34回キャピラリー電気泳動シンポジウム（SCE2014）
  • Place of Presentation: 京都大学 桂キャンパス
  • Year and Date: 2014-12-09 – 2014-12-11
• [Presentation] On-line Coupling of Immunoaffinity Chromatography and CIEF in a Single Capillary (2014)
  • Author(s): Kiyohito Shimura, Toshihiko Nagai
  • Organizer: 14th Aisa-Pacific International Symposium on Microscale Separations and Analysis
  • Place of Presentation: 京都大学 桂キャンパス
  • Year and Date: 2014-12-07 – 2014-12-10
• [Presentation] アフィニティープローブキャピラリー電気泳動による翻訳後修飾パターン分析 (2014)
  • Author(s): 志村清仁
  • Organizer: 第65回日本電気泳動学会総会
  • Place of Presentation: 横浜情報文化センター
  • Year and Date: 2014-10-24 – 2014-10-25
• [Presentation] 抗 E-tag 抗体カラムとキャピラリー等電点電気泳動のオンライン結合 (2014)
  • Author(s): 長井俊彦、志村清仁
  • Organizer: 第65回日本電気泳動学会総会
  • Place of Presentation: 横浜情報文化センター
  • Year and Date: 2014-10-24 – 2014-10-25
• [Presentation] 金属キレートクロマトグラフィーとキャピラリー等電点電気泳動のオンライン結合 (2014)
  • Author(s): 志村清仁、長井俊彦
  • Organizer: 第74回分析化学討論会
  • Place of Presentation: 郡山市
  • Year and Date: 2014-05-24 – 2014-05-25
• [Presentation] Direct coupling of affinity chromatography and capillary isoelectric focusing in a single capillary (2014)
  • Author(s): Kiyohito Shimura, Toshihiko Nagai
  • Organizer: 30th International Symposium on MicroScale Bioseparations
  • Place of Presentation: Pecs, Hungary
  • Year and Date: 2014-04-27 – 2014-05-01
• [Patent(Industrial Property Rights)] CAPILLARY DEVICE FOR SEPARATION AND ANALYSIS (2016)
  • Inventor(s): KIYOHITO SHIMURA ET AL
  • Industrial Property Rights Holder: SHIMURA & NICHIEI INDUSTRY
  • Industrial Property Rights Type: 特許
  • Filing Date: 2016-03-29
  • Overseas
• [Patent(Industrial Property Rights)] 分離分析用キャピラリーデバイス、分離分析用マイクロ流体チップ、タンパク質又はペプチド分析方法、電気泳動装置、及び分離分析用マイクロ流体チップ電気泳動装置 (2014)
  • Inventor(s): 志村清仁、長井俊彦、福原修一、瀬戸善一
  • Industrial Property Rights Holder: 志村清仁、長井俊彦、福原修一、瀬戸善一
  • Industrial Property Rights Type: 特許
  • Filing Date: 2014-10-14
  • Overseas