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脱細胞化肺移植による先天性横隔膜ヘルニアの低形成肺に対する再生医療

Research Project

Project/Area Number 26462709
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Research Field Pediatric surgery
Research InstitutionKyushu University

Principal Investigator

永田 公二  九州大学, 大学病院, 助教 (20419568)

Project Period (FY) 2014-04-01 – 2016-03-31
Project Status Discontinued (Fiscal Year 2015)
Budget Amount *help
¥5,070,000 (Direct Cost: ¥3,900,000、Indirect Cost: ¥1,170,000)
Fiscal Year 2016: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
Fiscal Year 2015: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
Fiscal Year 2014: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Keywords肺発達 / 脱細胞化 / 間葉系幹細胞 / 肺移植 / 再生医療
Outline of Annual Research Achievements

本年度も引き続き、ニトロフェン誘導CDHモデルラット肺を利用して、肺組織の脱細胞化及び脱細胞化組織への間葉系幹細胞、新生肺の肺移植培養実験を企画した。本実験の工程は3工程に分かれる。即ち、1)肺の脱細胞化、2)脱細胞化肺への間葉系幹細胞投与、3)肺移植である。
1)肺の脱細胞化:妊娠22日目の母獣を犠死せしめる際に母獣の内頸静脈と総頸動脈にカニュレーションし、内頸静脈より還流液である0.1%SDS溶液を2時間還流した後に胎仔肺を摘出した。その後、Western-blottingによって肺サーファクタントなどの肺に特異的分子のDNA数が減少している事を確認した。
2)間葉系幹細胞投与:間葉系幹細胞はプロトコールに従って抽出されたものを使用した。即ち、eGFP成獣肺から摘出した肺をPBSで洗浄して血液をウォッシュアウトした後に気管と結合組織を除去し、肺組織を潰し、0.4%のⅠ型コラーゲンと0.3%のディスパーゼⅡを37℃で1時間培養し、70μlのcell strainerに搭載して抽出した。細胞は24時間培養後にディッシュに接着する細胞のみを20% FBSに投与して培養した。細胞がディッシュ内に充満した後にpassageを確認した。得られた細胞は、間葉系細胞の特徴である紡錘形を有し、ディッシュに接着すること、免疫染色で多分化能を有すること、フローサイトメトリーでCD29陽性、CD45陰性である事を確認した。脱細胞肺への間葉系幹細胞の投与を試みたものの、脱細胞化肺自体の長期間培養は困難であり、間葉系幹細胞投与は困難であった。
3)肺移植:当初、予定であった肺移植実験は、脱細胞化肺の長期培養が困難であった事から移植自体が不可能であり、困難であった。

Report

(2 results)
  • 2015 Annual Research Report
  • 2014 Research-status Report
  • Research Products

    (26 results)

All 2016 2015 2014

All Journal Article (9 results) (of which Int'l Joint Research: 4 results,  Peer Reviewed: 7 results,  Open Access: 3 results,  Acknowledgement Compliant: 2 results) Presentation (16 results) (of which Int'l Joint Research: 3 results,  Invited: 2 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Growth Assessment and the Risk of Growth Retardation in Congenital Diaphragmatic Hernia: A Long-Term Follow-Up Study from the Japanese Congenital Diaphragmatic Hernia Study Grou2016

    • Author(s)
      Terui K, Nagata K, Hayakawa M, Okuyama H, Goishi K, Yokoi A, Tazuke Y, Takayasu H, Yoshida H, Usui N.
    • Journal Title

      Eur J Pediatric Surg.

      Volume: 26 Issue: 01 Pages: 60-6

    • DOI

      10.1055/s-0035-1566094

    • Related Report
      2015 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] 新生児編 疾患:いかに的確に対応するか 先天性横隔膜ヘルニア 特集 周産期救急の初期対応:そのポイントとピットフォール 胎児・新生児編.2015

    • Author(s)
      永田公二、和田桃子、岩中 剛、江角元史郎、木下義晶、田口智章.
    • Journal Title

      周産期医学

      Volume: 45 Pages: 928-932

    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Journal Article] Hirschsprung病類縁疾患成人例の実際2015

    • Author(s)
      永田公二、小幡聡、吉丸耕一朗、神保教広、宮田潤子、家入里志、田口智章
    • Journal Title

      小児外科

      Volume: 45 Pages: 693-699

    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Journal Article] Reevaluation of acetylcholinesterase staining for the diagnosis of hirschsprung disease and allied disorders.2015

    • Author(s)
      Budianto IR, Obata S, Kinoshita Y, Yoshimaru K, Yanagi Y, Miyata J, Nagata K, Ieiri S, Taguchi T
    • Journal Title

      J Pediatr Gastroenterol Nutr

      Volume: 60 Issue: 5 Pages: 606-12

    • DOI

      10.1097/mpg.0000000000000664

    • Related Report
      2015 Annual Research Report 2014 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Extracorporeal membrane oxygenation for congenital diaphragmatic hernia in Japan.2015

    • Author(s)
      Inamura N, Usui N, Okuyama H, Nagata K, Kanamori Y, Fujino Y, Takahashi S, Hayakawa M, Taguchi T
    • Journal Title

      Pediatr Int

      Volume: 57(4) Issue: 4 Pages: 682-6

    • DOI

      10.1111/ped.12554

    • Related Report
      2015 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Surgical approaches for neonatal congenital diaphragmatic hernia: a systematic review and meta-analysis.2015

    • Author(s)
      Terui K, Nagata K, Ito M, Yamoto M, Shiraishi M, Taguchi T, Hayakawa M, Okuyama H, Yoshida H, Masumoto K, Kanamori Y, Goishi K, Urushihara N, Kawataki M, Inamura N, Kimura O, Okazaki T, Toyoshima K, Usui N.
    • Journal Title

      Pediatr Surg Int

      Volume: 31(10) Issue: 10 Pages: 891-7

    • DOI

      10.1007/s00383-015-3765-1

    • Related Report
      2015 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Current clinical features in diagnosis and treatment for immaturity of ganglia in Japan: analysis from 10-year nationwide survey.2015

    • Author(s)
      Ieiri S, Miyoshi K, Nagata K, Miyata J, Kohashi K, Oda Y, Taguchi T.
    • Journal Title

      Pediatr Surg Int

      Volume: 31(10) Issue: 10 Pages: 949-54

    • DOI

      10.1007/s00383-015-3774-0

    • Related Report
      2015 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Risk factors for the recurrence of the congenital diaphragmatic hernia-report from the long-term follow-up study of Japanese CDH study group.2015

    • Author(s)
      Nagata K, Usui N, Terui K, Takayasu H, Goishi K, Hayakawa M, Tazuke Y, Yokoi A, Okuyama H, Taguchi T.
    • Journal Title

      Eur J Pediatr Surg

      Volume: 25 Issue: 01 Pages: 9-14

    • DOI

      10.1055/s-0034-1395486

    • Related Report
      2014 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Therapeutic potential of mesenchymal stem cell transplantation in a nitrofen-induced congenital diaphragmatic hernia rat model.2014

    • Author(s)
      Yuniartha R, Alatas FS, Nagata K, Kuda M, Yanagi Y, Esumi G, Yamaza T, Kinoshita Y, Taguchi T.
    • Journal Title

      Pediatr Surg Int

      Volume: 30(9) Issue: 9 Pages: 907-914

    • DOI

      10.1007/s00383-014-3576-9

    • Related Report
      2014 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] 在宅静脈栄養中の小児短腸症患者におけるmodified cyclic HPNの有用 性に関する検討2016

    • Author(s)
      永田公二,岩中剛,神保教広,江角元史郎,山下さきの,田口智章
    • Organizer
      第31回日本静脈経腸栄養学会
    • Place of Presentation
      福岡
    • Year and Date
      2016-02-25
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] 胎児鏡下バルーン気管閉塞術後先天性横隔膜ヘルニアの1剖検例2015

    • Author(s)
      永田公二,岩中剛,三好きな,江角元史郎,木下義晶,田口智章
    • Organizer
      第13回日本胎児治療学会
    • Place of Presentation
      横浜
    • Year and Date
      2015-11-21
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] Congenital Diaphragmatic Hernia ; How to treat with the limited sources-2015

    • Author(s)
      Nagata K,Iwanaka T,Miyoshi K,Esumi G,Kinoshita Y,Taguchi T.
    • Organizer
      Annual Meeting of the 23rd Indonesian Pediatric Surgeon
    • Place of Presentation
      Palembang, Indonesia
    • Year and Date
      2015-11-07
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] 在宅静脈栄養管理における栄養評価の重要性2015

    • Author(s)
      永田公二,江角元史郎,岩中剛,木下義晶,田口智章
    • Organizer
      第51回日本小児外科代謝栄養研究会
    • Place of Presentation
      熊本
    • Year and Date
      2015-10-29
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] 軟性気管支鏡ガイド下挿管が有用であった先天性横隔膜ヘルニアの2例2015

    • Author(s)
      永田公二,江角元史郎,岩中剛,木下義晶,田口智章
    • Organizer
      第24回日本小児呼吸器学会
    • Place of Presentation
      倉敷
    • Year and Date
      2015-10-23
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] The timing of surgery and the endoscopic surgery for CDH neonates: update by means of a systematic review and a meta-analysis2015

    • Author(s)
      Nagata K, Usui N, Terui K, Itou M, Yamoto M, Shiraishi M, Toyoshima K, Taguchi T
    • Organizer
      CDH Workshop 2015
    • Place of Presentation
      Tronto, Canada
    • Year and Date
      2015-09-15
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 胸腔鏡下横隔膜ヘルニア根治術を施行した先天性横隔膜ヘルニアの1例2015

    • Author(s)
      永田公二,和田桃子,福原雅弘,栗山直剛,家入里志,田口智章
    • Organizer
      第25回九州内視鏡下外科研究会
    • Place of Presentation
      熊本
    • Year and Date
      2015-08-29
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] The current status and the future perspectives of the Japanese CDH Study Group2015

    • Author(s)
      Nagata K
    • Organizer
      第51回日本周産期新生児学会
    • Place of Presentation
      福岡
    • Year and Date
      2015-07-10
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] Laparoscopic vascular hitch operationを行った腎盂尿管移行部通過障害を合併した馬蹄腎の1例2015

    • Author(s)
      永田公二,栗山直剛,福原雅弘,家入里志,田口智章
    • Organizer
      第24回日本小児泌尿器学会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2015-07-02
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] 極低出生体重児の腸瘻閉鎖時期に関する検討2015

    • Author(s)
      永田公二,江角元史郎,宗崎良太,宮田潤子,松浦俊治,木下義晶,田口智章
    • Organizer
      第29回日本小児ストーマ排泄管理研究会
    • Place of Presentation
      新潟
    • Year and Date
      2015-06-27
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] The outcome comparison between the early operation vs the delayed operation in congenital diaphragmatic hernia-a systematic review, meta-analysis of English and Japanese literature -2015

    • Author(s)
      Nagata K,Usui N,Terui K,Itou M,Yamoto M,Shiraishi M,Toyoshima K,Taguchi T
    • Organizer
      16th European Congress of Pediatric Surgery
    • Place of Presentation
      Ljubljana, Slovenia
    • Year and Date
      2015-06-17
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 先天性横隔膜ヘルニアの手術時期に関するsystematic reviewとメタ解析2015

    • Author(s)
      永田公二、照井慶太、伊藤美春、白石真之、矢本真也、 早川昌弘、奥山宏臣、稲村 昇、金森 豊、五石圭司、 田附裕子、横井暁子、川瀧元良 、漆原直人、岡崎任晴、 木村 修、増本幸二、豊島勝昭、臼井規朗、田口智章
    • Organizer
      第52回日本小児外科学会
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      2015-05-30
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] 周産期医療現場における小児外科医の倫理的諸問題2014

    • Author(s)
      永田公二,和田桃子,江角元史郎,木下義晶,田口智章
    • Organizer
      第30回日本小児外科学会周期シンポジウム
    • Place of Presentation
      淡路島
    • Year and Date
      2014-11-01
    • Related Report
      2014 Research-status Report
  • [Presentation] 胸腔羊水腔シャントを施行された複数肺葉におよぶ先天性嚢胞性腺腫様奇形(CCAM/CPAM)に対して中葉+下葉区域切除を施行した1例2014

    • Author(s)
      永田公二,和田桃子,岩中剛,江角元史郎,田口智章
    • Organizer
      第25回小児呼吸器外科研究会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2014-10-24
    • Related Report
      2014 Research-status Report
  • [Presentation] 多施設共同研究における新生児横隔膜ヘルニアの長期予後に関する検討2014

    • Author(s)
      永田公二
    • Organizer
      第50回日本周産期新生児医学会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2014-07-15
    • Related Report
      2014 Research-status Report
  • [Presentation] Risk factors for the recurrence of the congenital diaphragmatic hernia– report from the long-term follow-up study of Japanese CDH Study Group –2014

    • Author(s)
      Nagata Kouji, Usui Noriaki, Terui Keita, et al.
    • Organizer
      EUPSA2014
    • Place of Presentation
      Ireland, Dubrin
    • Year and Date
      2014-06-19
    • Related Report
      2014 Research-status Report
  • [Book] 新生児先天性横隔膜ヘルニア(CDH)診療ガイドライン2016

    • Author(s)
      新生児先天性横隔膜ヘルニア研究グループ
    • Total Pages
      116
    • Publisher
      メジカルビュー社
    • Related Report
      2015 Annual Research Report

URL: 

Published: 2014-04-04   Modified: 2017-01-06  

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