Alternative splicing regulation of the titin gene in dilated cardiomyopathy.

• Project/Area Number: 26670398
• Research Category: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Research Field: Cardiovascular medicine
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: KUROYANAGI Hidehito 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 准教授 (30323702)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2016-03-31
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2015)
• Budget Amount: ¥3,640,000 (Direct Cost: ¥2,800,000、Indirect Cost: ¥840,000); Fiscal Year 2015: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000); Fiscal Year 2014: ¥2,210,000 (Direct Cost: ¥1,700,000、Indirect Cost: ¥510,000)
• Keywords: タイチン / 拡張型心筋症 / mRNA / 選択的スプライシング / RBM20 / リン酸化 / 核移行 / スプライシング / 心筋症 / 受動的張力 / 細菌人工染色体 / 蛍光レポーター

Outline of Final Research Achievements

We have constructed fluorescence splicing reporter minigenes to visualize heart-specific alternative splicing of the TTN gene. We utilized the reporter system to analyze the heart-specific splicing regulation by RBM20. Mutations in the RBM20 gene identified in the dilated cardiomyopathy patients are enriched in the RSRSP stretch and we found that the RSRSP stretch is phosphorylated in cells and is crucial for RBM20 to be localized in the nucleus. The fluorescence TTN splicing reporter cell lines, RBM20-expressing cell lines and the anti-phospho-RBM20 antibody generated in this study can further be utilized in analyzing the effects of mutations in the RBM20 and screening for chemicals that can modify the function and localization of RBM20.

Research Products

• [Presentation] 拡張型心筋症患者に変異が見出されるRNA 結合タンパク質RBM20 によるTTN遺伝子の心筋特異的スプライシング制御機構 (2016)
  • Author(s): 村山里枝、木村まり子、大野麻理奈、山崎-加藤裕美子、黒柳秀人
  • Organizer: 冬の若手ワークショップ2016＠山中湖
  • Place of Presentation: 山梨県南都留郡山中湖村
  • Year and Date: 2016-02-04
• [Presentation] TTN遺伝子の選択的スプライシングモニタリングと拡張型心筋症の創薬スクリーニング (2015)
  • Author(s): 山崎裕美子、村山里枝、大野麻理奈、黒柳秀人
  • Organizer: BMB2015（第38回日本分子生物学会年会、第88回日本生化学会大会 合同大会）
  • Place of Presentation: 神戸ポートアイランド
  • Year and Date: 2015-12-01
  • Invited
• [Presentation] 拡張型心筋症患者に変異が見出されるRBM20のRS-rich領域はリン酸化され核移行とスプライシング制御に必須である (2014)
  • Author(s): 村山里枝、木村まり子、大野麻理奈、黒柳秀人.
  • Organizer: 第16回日本RNA学会年会
  • Place of Presentation: ウインクあいち
  • Year and Date: 2014-07-23 – 2014-07-25
• [Remarks] 東京医科歯科大学難治疾患研究所難病筋疾患研究プロジェクト
  • URL: http://www.tmd.ac.jp/musdp/
• [Remarks] 東京医科歯科大学難治疾患研究所 フロンティア研究室遺伝子発現制御学
  • URL: http://www.tmd.ac.jp/end/
• [Remarks] 東京医科歯科大学難治疾患研究所
  • URL: http://www.tmd.ac.jp/mri/press/index.html