カルシウムイオン受容タン白質の化学構築

Research Project

Project/Area Number	60123001
Research Category	Grant-in-Aid for Special Project Research
Allocation Type	Single-year Grants
Research Institution	Hokkaido University
Principal Investigator	八木康一北海道大学, 理, 教授 (90000728)
Project Period (FY)	1985
Project Status	Completed (Fiscal Year 1985)
Budget Amount *help	¥12,500,000 (Direct Cost: ¥12,500,000) Fiscal Year 1985: ¥12,500,000 (Direct Cost: ¥12,500,000)
Keywords	カルモデユリン / トロポニン / カルシウム受容蛋白 / 蛋白のNMR
Research Abstract	【I】.カルシウムイオン受容タン白質の構造テトラヒメナ・ミドリムシ・小麦胚芽・鮭筋肉・ナマコ・電気ウナギ・パン酵母からカルモデユリンを分離・精製し、それらの一次構造を決定した。ナマコと電気ウナギのカルモデユリンにはイソ蛋白質の存在がみとめられた。分裂酵母のものでは極めて高いホモロジーが特徴的である。(戸田) アオゴカイの筋肉に存在するカルシウムイオン結合蛋白質には3種類あることが、一次構造研究によってみいだされた。これらの生理活性は現在検討中である。ザリガニ筋肉のトロポニンCもC【I】とC【II】の2種類分離されたが、両者の一次構造決定はほゞ完成した。テトラヒメナの1万の分子量をもつカルシウムイオン結合タン白質には、前駆体が存在するらしいので、この点を確める実験をすすめている。(高木) ホタテ精巣カルモデユリン・ウサギ骨格筋トロポニンCの高分解能NMRによる構造研究をおこなった。トロポニンCはNMR測定にたえる高濃度ではSS結合をつくリダイマーになる。DTTなどを加えモノマーの状態で測定する条件を確立した。二次元NMRを応用、アミノ酸の帰属をすすめている。(引地) 【II】.カルシウムイオン受容タン白質と生理活性骨格筋ミオフィブリルをCyDTA処理することによって、トロポニンCだけを選択的に除去することに成功し、この方法を確立した。このようにして調製したミオフィブリルを試料にして、骨格筋と心筋のトロポニンCを比較した。(大槻) 粘菌Physarumからミオシンを分離した。さらに1.4万の蛋白質を分離したが、カルシウム結合力をしめし、アチチソ-ミオシン系ATPase活性を阻害した。(小浜)カルモデユリンを半分に切断してえたNドメインとCドメインは、いづめも酵素活性化能を失っていることがあきらかになった。(八木)