非A非B型肝炎感染チンパンジーからのウイルス分離

Research Project

Project/Area Number	60480157
Research Category	Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Experimental pathology
Research Institution	Nihon University
Principal Investigator	志方俊夫日本大学, 医学部, 教授 (50009932)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	杉谷雅彦日本大学, 医学部, 助手 (40187654) 鈴木高祐日本大学, 医学部, 助手 (00158974) 江角真理子日本大学, 医学部, 講師 (60160363) 清水洋子 , 予研腸内ウイルス部, 研究官 (00142357) 内田俊和日本大学, 医学部, 助教授 (80060078)
Project Period (FY)	1985 – 1987
Project Status	Completed (Fiscal Year 1987)
Budget Amount *help	¥6,400,000 (Direct Cost: ¥6,400,000) Fiscal Year 1987: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000) Fiscal Year 1986: ¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000) Fiscal Year 1985: ¥2,800,000 (Direct Cost: ¥2,800,000)
Keywords	非A非B型肝炎 / モノクロナール抗体 / チンパンジー感染実験
Research Abstract	残念ながら非A非B型肝炎ウイルスの分離はまだ成功していない。非A非B型肝炎に感染したチンパンジー及びヒトの回復期のリンパ球からEBウイルストランスフォーメイション法で確立した非A非B型肝炎関連モノクロナール抗体、及びそれに対応する抗原の解析がすすめられた。この抗原は非A非B型肝炎とデルタ肝炎に感染したチンパンジーあるいはヒトの非A非B型肝炎急性期に特異的に認められた。電顕レベルの酵素抗体法で感染したチンパンジーの肝細胞に見られるmicrotubular aggregateに反応することが明らかになった。すでにこの抗原は精製され京都大学の中西教授のもとでアミノ酸組成の解明、cDNAのクローニングも終わった。このcDNAをプローブとして細胞のDNAを調べると既に細胞のDNAにこの遺伝子があることも判明した。既ちこの抗原はウイルスの遺伝子で読まれているものではなく、非A非B型肝炎ウイルス感染に関連して、細胞遺伝子の発現がおこるものと考えられる。それならば正常の状態で体のどこかでこの遺伝子の発現があるかどうか調べた。ただ正常のチンパンジーの各臓器の凍結材料が手にはいらず、非A非B型肝炎に感染した2頭のチンパンジーを使用した。各臓器を酸素抗体法で染色すると副腎の皮質細胞に抗原が染まり、電顕レベルの酵素抗体法でmicrotubular aggregateに類似した構造が染まった。ただこれが非A非B型肝炎ウイルス感染に関連して発現するのか正常でも発現しているのかまだ明らかではない。現在さらに同じEBウイルストランスフォーメイション法及び若干の工夫を加えたマウスハイブリドーマ法で非A非B型肝炎ウイルスの遺伝子でコードされている抗原に対するモノクロナール抗体を取るべく作業を進めている。なぜならばウイルスを見つける為にはウイルスの遺伝子で読まれている抗体の方が便利であるからである。