毒薬危検薬を含まない血液ヘモグロビン測定試薬の開発

• Project/Area Number: 60870098
• Research Category: Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Laboratory medicine
• Research Institution: Ginkyo College of Medical Science
• Principal Investigator: 松原 高賢 銀杏短, その他, 教授 (80040145)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 三村 孝俊 銀杏学園短大, 衛生技術科, 講師 (70123875) ; 福島 世紀 銀杏学園短大, 衛生技術科, 助教授 (60071875)
• Project Period (FY): 1985 – 1986
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1986)
• Budget Amount: ¥3,700,000 (Direct Cost: ¥3,700,000); Fiscal Year 1986: ¥400,000 (Direct Cost: ¥400,000); Fiscal Year 1985: ¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
• Keywords: ヘモグロビン測定 / 界面活性剤

Research Abstract

1.陰イオン性界面活性剤による方法 入手しうる限りの多種の陰イオン性界面活性剤を検討し、ヘモグロビン(Hb)測定に利用できるもの数種が見出されたが、そのうち純品として最も入手し易くしかも安価なラウリル硫酸ナトリウム(SLS)を採用し、これを用いて実用上満足すべきHb測定試薬を開発することができた。
(1)反応機序 Hb【O_2】液及びメトヘモグロビン(Hi)液とSLS の反応を吸収スペクトル的に解析して次の機序が推定された。SLSによりHb【O_2】はHiに転化し、さらにHiの誘導体【I】に変化する。この反応はHi1分子に対しSLS約100分子で完結する。SLSの量が多いと誘導体【I】から誘導体【II】を生ずるが、SLSが10,000分子に至っても反応は完結せず【I】と【II】の平衡的状態にある。たゞしこれは巨視的解釈であって微視的には【II】はSLSの量に応じて生成される連続的誘導体の総称と解すべきである。【I】,【II】ともに535mmに極大吸収を持ち、SLSが多いほど吸光係数が低い。
(2)以上の反応にはpH,イオン強度,非イオン性界面活性剤の有無が影響する。血液Hb測定に好適な条件はpH7.4〜8.0,リン酸緩衝液M/15〜M/60,トリトン×1000,0.3〜0.1g/dl,SLS2〜5mMである。
(3)用手的方法で血液についてSLS法と従来のシアンメトヘモグロビン法を比較したところ、両者の成績は満足すべき精度で一致した。
(4)今後実施予定の研究事項 病院の臨床検査室において担当の検査技師が実地に本法を使用し、現行のシアンメトヘモグロビン法と一致する値がえられることを確認する必要がある。次に本法を自動多項目血球計数機に組込むことを工夫する。
2.陽イオン性界面活性剤法,アルカリヘマチン法については今後も検討を進める。