| Project/Area Number |
61226003
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Special Project Research
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
三浦 謹一郎 東大, 工学部, 教授 (30000227)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
平尾 一郎 東京大学, 工学部, 助手 (50173216)
熊谷 泉 東京大学, 工学部, 助手 (10161689)
渡辺 公綱 東京大学, 工学部, 助教授 (00134502)
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| Project Period (FY) |
1986
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1986)
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| Budget Amount *help |
¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
Fiscal Year 1986: ¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
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| Keywords | タンパク質合成 / リボ核酸 / RNA / メッセンジャーRNA(mRNA) / 転移RNA(tRNA) / リボソーム / 遺伝子の情報発現 / 核酸の化学合成 |
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| Research Abstract |
本研究の目的は将来人工容器内で安定で効率のよいタンパク質合成システムを作り上げるためにタンパク質の生合成系において中心的な役割を果しているメッセンジャーRNA(mRNA)及びアミノ酸転移RNA(tRNA)について必要最小限の構造を究め、丈夫で、タンパク質合成効率のよい状態にするにはどのような構造を持たせればよいかを明らかにすることである。
真核細胞のmRNAには5´末端に我々が発見したキャップ構造があり、読み始め信号A-U-Gとの間にいろいろな長さの先導配列をもつ。読み始めコドンA-U-Gや読み始めには使われないコドンとしてG-U-Aを化学合成し、これらにキャップを被せたものを合成した。また、これらに[【^(32)P】]pCpをRNAリガーゼで結合させてラベルし、リボソームとの会合によるタンパク質合成開始複合体の形成を調べた。A-U-Gだけでも複合体が形成されるが、G-U-Aでは全く複合体の形成は見られず、A-U-Gにキャップを被せると、複合体形成効率がさらに高まった。この結果によりmRNAはA-U-Gさえあればタンパク質合成開始の状態に入れるが、キャップがあればこの効率を高めることができ、キャップとA-U-Gの間の塩基配列如何によってさらに効率を高めることができることを明らかにした。
mRNA断片の化学合成方法についても検討し、保護基に工夫を加え、固相法によって18merの長さのポリリボヌクレオチドを合成できた。
哺乳類のミトコンドリアのセリン(A-G-Yコドン)tRNAはDループを欠く簡単なtRNAであるが、二次構造の変化によって活性型から不活性型に簡単に変換させることができ、条件を選べば不活性型から活性型に再生できることを明らかにした。
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