In Situ Hybridizationによる肝炎ウイルスおよび発癌遺伝子同定:小さな肝細胞癌における検索

Research Project

Project/Area Number	61570326
Research Category	Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Gastroenterology
Research Institution	Chiba University
Principal Investigator	伊藤よしみ千葉大学, 医学部, 助手 (70159929)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	奥田邦雄千葉大学, 名誉教授 (40009519) 今関文夫千葉大学, 医学部, 医員
Project Period (FY)	1986 – 1987
Project Status	Completed (Fiscal Year 1987)
Budget Amount *help	¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000) Fiscal Year 1987: ¥300,000 (Direct Cost: ¥300,000) Fiscal Year 1986: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
Keywords	In Situ Hybridization / 細小肝癌 / 発癌遺伝子 / HBV DNA / 点変異 / 合成 DNA / In situ hybridization法
Research Abstract	小さな肝癌生検材料でrasおよびmycの発癌遺伝子の発現の同定を行うには, In situ Hybridizationが適しているが, 実際にこの方法での検索は少く, 最初に予備実験として再生肝における発癌遺伝子の発現について検査したこの実験の結果In situ Hybridization法によっても発癌遺伝子の発現の検索は可能となった. 次に小さな肝癌についてrasおよびmycの発癌遺伝子について検索すると生検例中明らかな癌にはras遺伝子の発現の増加を見たが, hyperplastic noduleの例では発癌遺伝子の発現の増加は見られなかった. 肝癌部での発癌遺伝子とウイルス(HBV)DNAの組み込みとの相関をみるため, HBVの全DNAプローブの他にsubgenomicプローブ(S-gene, C-gene, X-geneのそれぞれの領域とのみ結合するプローブ)を作製した. これらのプローブを用いて検索した結果では肝癌部において発癌遺伝子発現とHBV-DNA組み込みとの相関はみられなかった. 肝癌部でのras遺伝子の点変異(one point mutation)を検索するため, 正常ras遺伝子DNA及び, 点変異ras遺伝子DNAを合成し, これらをプローブとして検索した結果, 肝癌部ではras遺伝子の点変異が明確に生じているとは言えなかった. しかしながら大腸癌ではras遺伝子DNAの12番目又は13番目に点変異が生じていることが認められた.