クロイツフェルト・ヤコブ病の発症因子と発症機序の解明

Research Project

Project/Area Number	61570530
Research Category	Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Psychiatric science
Research Institution	Kitasato University
Principal Investigator	玉井洋一北里大, 医学部, 助教授 (80050441)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	内田紀久枝麻布大学, 環境保健学部, 実験助手 (90176686) 田口文章北里大学, 衛生学部, 教授 (40050455) 三浦貞則北里大学, 医学部, 教授 (70050383) 大谷義夫北里大学, 医学部, 講師 (40095500)
Project Period (FY)	1986
Project Status	Completed (Fiscal Year 1986)
Budget Amount *help	¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000) Fiscal Year 1986: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
Keywords	クロイツフエルト・ヤコブ病 / 亜急性海綿状脳症 / スクレピー / 遅発性ウイルス感染症 / SAF / プリオン / 感染因子
Research Abstract	クロイツフエルト・ヤコブ病(CJD)は痴呆を主症状とする変性疾患の一つであるが発病機序は全く不明である。感染説の立場からSAFあるいはプリオンと呼ばれるアミロイド様タンパクを含む画分と発症因子との関連が示唆されているが、実体は明らかでない。本研究は感染説にとらわれることなく、広く発症機序解明のため発症因子の部分精製と発症能の分布について検索を行った。 1.発症因子画分の部分精製は基本的にはDiringerらの方法に準じた。ヒトCJD由来の発症マウス脳(大脳と小脳)9.3gを用い、10%サルコシル処理、遠心(22,000×g,30分→215,000×g,2時間)、プロティナーゼK処理等を行って、最終的に脳ホモジネート(Hom)を10画分に分けた。2.10画分のタンパク成分を電気泳動で解析した。最終画分【P_(215)】s-aは分子量19,22,27Kの3つのバンドを示した。このバンドはニトロセルロース膜転写後、抗プリオンペプチド抗体と反応することより、いわゆるSAFあるいはプリオンタンパクに相当することがわかった。3.Homと10の亜画分をマウス脳に接種し、感染価を測定した。タンパク量1〜4μgのオーダーでは各画分とも130〜140日を最小潜伏期間とし、以後稀釈とともに潜伏期間が延長した。本研究は現時点ではまだ継続中であるが、接種タンパク量0.1〜0.4μgのオーダーでHom,E2,【P_(215)】s-a,【P_(215)】s-b画分に強い感染能が観察されており、発症率は100%である。即ち100pgのレベルではHomと3つの分画画分との間に発症能の差は見い出されなかった。従来の研究では分子量27〜30Kタンパクを含む画分と発症能との間に強い相関が示唆されているが、本研究の結果は発症能が19〜27Kタンパクと必ずしも挙動をともにしないことを示唆するものである。