ポリオーマウイルス発癌遺伝子の機能解析

Research Project

Project/Area Number	62015039
Research Category	Grant-in-Aid for Cancer Research
Allocation Type	Single-year Grants
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	伊藤嘉明京都大学, ウイルス研究所, 教授 (80004612)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	佐竹正延京都大学, ウイルス研究所, 助手 (50178688) 野田哲生京都大学, ウイルス研究所, 助手 (10183550)
Project Period (FY)	1987
Project Status	Completed (Fiscal Year 1987)
Budget Amount *help	¥4,600,000 (Direct Cost: ¥4,600,000) Fiscal Year 1987: ¥4,600,000 (Direct Cost: ¥4,600,000)
Keywords	中型T抗原 / Haーras;エンハンサー / 調節因子 / オンコジーン / CATアッセイ / トランスフォーメーション / ポリオーマウイルス
Research Abstract	ポリオーマウイルスの持つ三種の発癌遺伝子産物,大・中・小型T抗原の機能解析に関し本年度最も進展のあったのは中型T抗原の機能に関連した研究である. 即ち, 中型T抗原はp60^<cーsrc>と結合しチロシン特異的リン酸化酵素活性を恒常的に上昇させるが, その異常なシグナルが最終的に核に到達する際それを受けとめると考えられるもの, 即ち遺伝子発現に直接関与している転写制御因子が如何なる影響を受けるかとの立場からの研究である. ポリオーマウイルス・エンハンサーはN1H3T3細胞で機能し, これに連結したCAT遺伝子を発現させる. このCAT遺伝子を持つプラスミドを中型T抗原遺伝子或はHaーras遺伝子と同時にトランスフェクトするとCAT活性が促進される. Haーrasの場合, この促進能は24塩基対よりなるAエレメントと呼ばれるエンハンサーの亜領域を標的とする事が判明した. Aエレメントには三つの機能単位があり, そのうちの二つに特異的に結合する因子B及びCをN1H3T3細胞の核抽出液中より検出した. Haーrasによる活性促進は主としてB因子を標的として起る. 一方HaーrasでトランスフォームしたN1H3T3細胞の核抽出液中にはB因子もC因子も検出されず, 代って新しい因子Dが検出された. しかもD因子の認識部位はC因子のそれと全く同一であった. 中型T抗原でトランスフォームした細胞でも全く同様の因子の変化が見られた. 中型T抗原やHaーras等のオンコジーンがエンハンサーの機能の発揮に直接かかわっている調節因子の活性・存在様式を劇的に変化させるとの所見は, 細胞癌化課程で起る遺伝子発現の変化の原因の一部がこれら調節因子の機能の変化であるというきわめて重要な可能性を示唆するものと考えられる.