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葉緑体の増殖および分化過程における葉緑体核の動態解明とその制御の試み

Research Project

Project/Area Number 62219012
Research Category

Grant-in-Aid for Special Project Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionOkazaki National Research Institutes

Principal Investigator

長田 敏行  岡崎国立共同研究機構, 基礎生物学研究所, 助教授 (10012519)

Project Period (FY) 1987
Project Status Completed (Fiscal Year 1987)
Budget Amount *help
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1987: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Keywordsタバコ / 培養細胞 / 色素体 / DNA合成 / 分裂 / DAPI / 蛍光顕微鏡
Research Abstract

植物細胞としては, 増殖の最も早いタバコ培養細胞BY2株を用いて, 色素体のDNA合成および分裂を細胞核のDNA合成および分裂との関係を明らかにし, 核と細胞質の相互作用の動態解明を目的として研究を行なった.
一週間周期で継代されているBY2を, 一定の間隔でサンプリングし, DNAを特異的に染色する蛍光色素DAPIで染め, 蛍光顕微鏡で観察し, 定量化は高感度顕微測光装置VIMシステムで行なったところ, 色素体核様体のDNA量は, 植え継ぎ直後から急激に増大するが, 28時間目をピークとして後は低下の一方であった. オートラジオグラフィーは, 色素体DNA合成が最初の日に集中することを示していた. これに対し, 細胞核のDNA合成は, 色素体DNA合成に遅れて起こったが, 6日目まで継続し, 分裂も6日目まで観察された. このことは, 色素体のDNA合成と細胞核のDNA合成は, 相互に独立であることを示している. その結果, BY2細胞では, 細胞当りの色素体DNA合成は, 1日の培養で十倍以上になるが, 培養とともに娘細胞に分配される一方で, 静止相には元の値となる. このことは, 色素体と細胞核の相互作用を探る上で極めて興味ある実験系を提供しているとともに, 細胞の大量培養が容易であることから分子レベルの解析に好適であることを示している. なお, 同時に従来の細胞当りの色素体DNAのコピー数の算出の研究が全て再検討を要することも示された. また, 色素体は, 培養とともにアミロプラストを経て, 白色体にもなるので色素体の形態研究にも適していることも示された. 一方, 新鮮な培地に移して, 直ちに認められるこの急激な色素体DNA合成の主要な制限要因がリン酸であることも示されので, 培地成分による色素体DNA合成の制御という興味あるテーマも提供している.

Report

(1 results)
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All Publications (8 results)

  • [Publications] T.Nagata: Molecular and General Genetics. 207. 242-244 (1987)

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  • [Publications] T.Nagata: Methods in Enzymology. 149. 176-185 (1987)

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  • [Publications] Y.Kamata: Theoretical and Applied Genetics. 75. 26-29 (1987)

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  • [Publications] S.Miyamura: Protoplasma. 141. 149-159 (1987)

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  • [Publications] Y.Nemoto: Plant and Cell Physiology. 29. 167-177 (1988)

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  • [Publications] T.Yasuda: Planta.

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  • [Publications] 中嶋,野本,松橋,三浦,村松編 長田 敏行: "生物材料の取扱い 新基礎生化学実験 1 ″植物の組織培養″" 丸善, 141-162 (1987)

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  • [Publications] 日本生化学会編 長田敏行: "続生化学実験講座 1 遺伝子研究法3細胞工学的技術 "リポソーム法"" 東京化学同人, 135-149 (1987)

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Published: 1987-04-01   Modified: 2016-04-21  

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