卵成熟過程において卵成熟促進因子の作用を抑える因子の同定

Research Project

Project/Area Number	62540562
Research Category	Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	動物発生・生理学
Research Institution	Okazaki National Research Institutes
Principal Investigator	岸本健雄岡崎国立共同研究機構, 基礎生物研究所, 助教授 (00124222)
Project Period (FY)	1987
Project Status	Completed (Fiscal Year 1987)
Budget Amount *help	¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000) Fiscal Year 1987: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
Keywords	卵成熟促進因子 / MPF / 分裂中期 / 分裂後期への移行 / G1期 / MPFの不活化因子 / マウス卵 / 酵母
Research Abstract	卵成熟促進因子(maturation-promoting factoriMPF)は, 単に卵母細胞にとどまらず真核細胞一般において, 分裂中期促進作用をもつ蛋白質である. 卵成熟過程においてMPF活性は, 各分裂中期に最高値に達し極体放出時には消失して, 減数分裂周期に応じて変動する. 本研究の目的は, MPF活性消失の意義と機構を明らかにして, MPF活性の調節機構を解明する糸口を得ることにある. 本年の研究の結果, 以下のことが判明した. 1.マウス末成熟卵は濾胞から培養液中に単離すると, 自然成熟をおこす. この際サイトカラシンDで処理すると, 第1減数分裂中期の状態で成熟分裂の進行は停止し, MPF活性は高いままに維持された. こうした時さらにシクロヘキシミドを加えると, MPF活性は減少・消失し, その後を追って染色体は両極へ分離し, やがて脱凝縮して核様の構造体が2個形成された. 従って, MPF活性の消失は分裂中期から後期への移行を促すといえる. 2.酵母Saccharomyces cerevisiaeにも, M期にはMPF活性が存在しているが, G1期には存在しない. そこで温度感受性突然変異体cdc20株を制限温度(36°C)で培養して核分裂中期に同調させたあと, 許容温度(24°C)に下げて細胞周期をG1期まで同調的に進行させ, そこから細胞質抽出物を得た. これと酵母MPF粗分画とを混合すると, MPF標品中に当初あったMPF活性が消失した. このことは, G1期の細胞内にはMPF活性を抑える因子 (suppressor MPF;supMPF)が存在している可能性を示唆している. 以上の結果から, 卵成熟時におけるMPF活性の周期的変動のうちの減少の方は, supMPFがMPF活性を抑えることに起因し, これが分裂中期から後期への移行の引金になると考えられる. 現在, supMPFに対する蛋白分解酵素, Ca等の影響を検討中であり, supMPFの大まかな化学的性質をまず明らかにしていきたい.