上皮生長因子とトランスフェリンの細胞内取り込み過程欠損変異株の分離と解析
| Project/Area Number |
62570137
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| Research Category |
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Pathological medical chemistry
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
秋山 伸一 鹿児島大学, 医学部, 教授 (60117413)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉村 昭彦 鹿児島大学, 医学部, 助手 (90182815)
菊地 博 鹿児島大学, 医学部, 助手 (30128425)
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| Project Period (FY) |
1987 – 1988
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1988)
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| Budget Amount *help |
¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
Fiscal Year 1988: ¥200,000 (Direct Cost: ¥200,000)
Fiscal Year 1987: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
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| Keywords | 上皮生長因子 / トランスフェリン / エンドサイトーシス / 細胞内取り込み過程 / 温度感受性変異株 |
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| Research Abstract |
1.上皮生長因子(EGF)-緑膿菌毒素(PE)複合体(EGF-PE)とトランスフェリン(TF)にリシンA鎖(RA)を結合させた複合体(TF-RA)を作製した。
2.EGF-PEに耐性な株100株あまりをヒト癌KB細胞より分離した。これらの変異株のほとんどが^<125>I-EGFとの結合量は親株の20〜50%に低下していたが、親和性に変化はみられなかった。また変異株のほとんどが親株よりも増殖速度が低下していた。また変異株はPEに交差耐性を示した。これらの実験結果はEGF-PE耐性形質がEGF受容体の減少と遊離のPEに耐性を獲得したことの両者に起因することを示している。
3.EGF-PE、TF-RAを高温(39℃)でヒト癌KB細胞に取り込ませ、そのあと低温(34℃)にて培養することにより温度感受性のエンドサイトーシス欠損株を3株分離した。さらに多くの変異株を分離するために、TF-RA、ジフテリア毒素(DT)、PE、の存在下に39℃で24時間KB細胞を培養し、トリプシン処理をしたあと温度を34℃に下降させ培養することにより、高温でこれらの毒素に同時に耐性な変異株を10株分離した。
これらの変異株についての変異部位の解析が進行中である。
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Report
(2 results)
Research Products
(14 results)
