大腸菌HU蛋白質の機能と生産調節の分子論的研究

Research Project

Project/Area Number	62615523
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Allocation Type	Single-year Grants
Research Institution	The Institute of Physical and Chemical Research
Principal Investigator	今本文男理化学研究所, ライフサイエンス筑波研究センター・分子遺伝学研究室, 主任研究員 (00029761)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	加納康正理化学研究所, ライフサイエンス筑波研究センター・分子遺伝学研究室, 副主任研究員 (50093399)
Project Period (FY)	1987
Project Status	Completed (Fiscal Year 1987)
Budget Amount *help	¥2,400,000 (Direct Cost: ¥2,400,000) Fiscal Year 1987: ¥2,400,000 (Direct Cost: ¥2,400,000)
Keywords	HU-1 / HU-2 / HupB / HupA / Hup欠失変異 / 低温感受性 / 核様体蛋白質 / 細胞分裂異状
Research Abstract	大腸菌LE392株よりHU-1とHU-2の遺伝子(それぞれhupBとhupA)をクローニングし, それぞれのDNA塩基配列を決定した. hupBは2つのプロモーターを, hupAは1つのプロモーターをもつことが, in vitro系での転写実験とin vivo系での転写実験によって確認された. hupBはGTGで, hupAはATGで開始されるコード領域を持ち, 翻訳終結コドンはいずれもTAAであった. 翻訳開始コドンの上流には7塩基(hupB)と6塩基(hupA)からなるリボゾーム結合配列(SDseguence)が認められた. hupBとhupAは大腸菌染色体上のそれぞれ10分と90分の位置に座位することが判明した. これらの遺伝学的な知見にもとづいて, 変異株の作成を試み, 現在複数の大腸菌株についてhup欠失変異株が分離されている. hupBはクロラムフェニュール耐性遺伝子DNAを挿入することによってHU-1コード領域を分断欠失させ, hupAにはカナマイシン耐性遺伝子を挿入させてHU-2欠失株を構築した. hupBとhupAの両遺伝子の欠失株も分離された. このような株では, 種々の表現形質に変化が認められ, Muファージなどは増殖することができないことが観察された. 現在, 他にもHU欠失によって増殖が不可能になったプラスミドなどが検出されており, これらを用いたHU-DNA相互作用の解析が可能であると考えされている. 大腸菌はhupBとhupAの両遺伝子の欠失によって比較的低温では増殖できなくなり, いわゆるcold sensitvityの性質に変わっていることが認められた. それとともに, 細胞がsnakig状態になることが認められた.