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厚切り切片法による細胞内構造の立体視

Research Project

Project/Area Number 63570018
Research Category

Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field General anatomy (including Histology/Embryology)
Research InstitutionTokyo Women's Medical University

Principal Investigator

串田 つゆ香  東京女子医科大学, 医学部, 教授 (90055723)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 飯島 治之  東京女子医科大学, 医学部, 助手 (40130231)
Project Period (FY) 1988 – 1990
Project Status Completed (Fiscal Year 1990)
Budget Amount *help
¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Fiscal Year 1990: ¥400,000 (Direct Cost: ¥400,000)
Fiscal Year 1989: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 1988: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Keywords厚切り切片法 / プラスチック包埋法 / ブロック染色法 / 300kV透過形電子顕微鏡 / マウス精巣組織 / 三次元的解析 / Quetol651包埋法 / 300KV透過形電子顕微鏡 / 細胞内構造の立体視 / Quetol 651 / 厚切り切片 / 立体視
Research Abstract

厚切り切片を高圧電子顕微鏡的に立体観察を行っているうち、従来の電子二重染色法を応用することは不適当であることがわかった。それは、切片が厚い場合、その両面と中間部との間に染色性の差が生じ、不均等な像を示すからである。本年度における実験的研究では、1〜5μmの厚切り切片を300kVの透過形電子顕微鏡で立体視することのできるブロック染色法を考案した。さらにこのブロック染色法によって得られた観察像と従来の電子染色法による像との比較検討も試みた。
〔方法〕ブロック染色法には、オスミウム酸の架橋剤として carboーhydrazide電子染色剤は、オスミウム酸および酢酸ウラニルを用いた。組織片は、2%オスミウム酸ーカコジル酸緩衝液で3時間個定、洗浄後、ブロック染色を行うが、その方法は、1)固定組織片を1%carboーhydrazide水溶液中に2時間 2)水洗 3)1%オスミウム酸水溶液の中に2時間 4)水洗後、50%アルコ-ルで1時間脱水 5)2.5%酢酸ウラニルの50%アルコ-ル水溶液で3時間染色 6)50%アルコ-ル1時間洗浄 7)アルコ-ル列でおのおの30分間の脱水を行う。脱水後の包埋は、Quetol 651樹脂混合液による串田方法を実施した。超ミクロト-ムにガラスナイフを用い、1ー5μmの厚切り切片を容易に作成できる。これらの切片をグリッド上に載物するが、この際、従来の電子二重染色は行わない。電顕観察は、透過形電子顕微鏡にサイドエントリ-傾斜装置を用い、加速電圧300kVにてステレオ観察を行った。
【観察結果】本法によるブロック染色法は、操作も容易であり、切片の深部に至るまで均等に、しかも、すぐれた染色性を獲得することができた。このブロック染色法を、とくに精子中間部におけるミトコンドリア鞘の三次元構造の解析に応用した結果、ラセン配列構築において従来、認め難かった、よりすぐれたステレオ像を把握することができた。

Report

(3 results)
  • 1990 Annual Research Report
  • 1989 Annual Research Report
  • 1988 Annual Research Report
  • Research Products

    (14 results)

All Other

All Publications (14 results)

  • [Publications] 串田 つゆ香,飯島 治之,串田 弘,会田 瑳武朗: "厚切り切片の400kV透過形電子顕微鏡によるステレオ観察のためのエポキシ樹脂Quetol 651 ー ERL 4206改良包埋法" 細胞. 22. 32-35 (1990)

    • Related Report
      1990 Annual Research Report
  • [Publications] 長戸 康和,嶋井 和世,串田 つゆ香,串田 弘: "Staining of Intestinal Goblet Cells with Ruthenium Red in Semithin Sections." J.Electron Microsc.39. 115-119 (1990)

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      1990 Annual Research Report
  • [Publications] 串田 つゆ香,飯島 治之,串田 弘,鶴田 忠正: "En bloc Staining Available for Stereoscopic Observation of Epoxy Resin Quetol 651 ーembedded Thick Sections under a 300 kV Transmission Electron Microscope." Proceedings of XIIth Int.Cong.Electron Microscopy. 3. 740-741 (1990)

    • Related Report
      1990 Annual Research Report
  • [Publications] 串田 つゆ香,飯島 治之,串田 弘,鶴田 忠正: "En Bloc Staning Available for Stereoscopic Observation of Epoxy Resin Quetol 651 ーembedded Thick Sections under a High Voltage Transmission Electron Microscope." J.Electron Micorsc.40. 76-77 (1991)

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      1990 Annual Research Report
  • [Publications] 長戸 康和,関口 雅樹,串田 つゆ香,串田 弘,嶋井 和世: "Correlative Light and Electron Microscopic Observations on Ectopic Neuron in the cerebellum of Dreher Mutant Mouse." J.Electron Microsc.40. 11-18 (1991)

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      1990 Annual Research Report
  • [Publications] 長戸康和,嶋井和世,串田つゆ香,串田弘: "準超薄切片のためのルテニウムリッド染色法 光学顕微鏡と電子顕微鏡のための包埋後染色(2)" 細胞. 21. 31-35 (1989)

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      1989 Annual Research Report
  • [Publications] 串田つゆ香,飯島治之,串田弘,鶴田忠正: "厚切り切片の300KV透過形電子顕微鏡によるステレオ観察のためのエボキシ樹脂Quetol651改良包埋法" 細胞. 21. 224-227 (1989)

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      1989 Annual Research Report
  • [Publications] 長戸康和,関口雅樹,串田つゆ香,串田弘,嶋井和世: "Us of semithin Sections Embedded in a Water Misuble Methacrylate for Light Mioroscopy of Central Nerve Tissues" Okajimas Folia Anat.Jpn.66. 145-152 (1989)

    • Related Report
      1989 Annual Research Report
  • [Publications] 串田つゆ香,飯島治之,串田弘,会田嵯武朗: "厚切り切片の400KV透過形電子顕微鏡によるステレオ観察のためのエボキシ樹脂Quetol650-ERL4206改良包埋法" 細胞. 22. 32-35 (1990)

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      1989 Annual Research Report
  • [Publications] 内野滋雄,鈴木卓朗,中井康光,石川博,他19名著編: "コアテキスト組織学串田つゆ香は男性生殖器の項(P.288〜310)分担執筆" 広川書店, 517 (1989)

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      1989 Annual Research Report
  • [Publications] 串田つゆ香: 昭和62年度科学研究費補助金(一般研究C)研究成果報告書. 1-10 (1988)

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      1988 Annual Research Report
  • [Publications] 串田つゆ香、飯島治之、串田弘、鶴田忠正: J.Electron Microsc.37. 212-214 (1988)

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      1988 Annual Research Report
  • [Publications] 長戸康和、嶋井和世、串田つゆ香、串田弘: 細胞. 20. 568-573 (1988)

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      1988 Annual Research Report
  • [Publications] 長戸康和、嶋井和世、串田つゆ香、串田弘: 細胞. 1. 31-35 (1989)

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      1988 Annual Research Report

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Published: 1988-04-01   Modified: 2016-04-21  

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