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細菌莢膜多糖体(K抗原)合成遺伝子のクローニングと解析

Research Project

Project/Area Number 63570191
Research Category

Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field 細菌学
Research InstitutionNagoya University

Principal Investigator

太田 美智男  名古屋大学, 医学部, 助教授 (20111841)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 加藤 延夫  名古屋大学, 医学部, 教授 (80022812)
木藤 伸夫  名古屋大学, 医学部, 助手 (80161511)
Project Period (FY) 1988
Project Status Completed (Fiscal Year 1988)
Budget Amount *help
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1988: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Keywords莢膜多糖 / 多糖合成遺伝子 / 遺伝子クローニング / klebsiella / LPS / rfb / rfe
Research Abstract

1.Klebsiellaの病原性因子の一つであるK2莢膜多糖合成遺伝子の領域にトランスポゾンTn5の挿入されたK2多糖欠失変異株を多数分離した。これらの菌株からTn5のKm耐性遺伝子を含む多数の染色体クローンを得た。
2.これらのクローンの解析から、K2莢膜多糖合成遺伝子領域の制限酵素地図を作製した。クローニングされた各DNA片は全体として合成遺伝子全領域をカバーしていると考えられた。
3.さらにTn5挿入部位は染色体の制限酵素地図上4つの領域に集中していることが明らかとなった。すなわちK2莢膜多糖合成遺伝子は染色体上の少くとも4つの領域に分かれて存在していると考えられた。
4.数種のクローンを特定の制限酵素部位で結合し、左端より24Kb、右端より22Kbの、合成遺伝子領域の大部分を含むそれぞれのDNA片を有するクローンを得た。これらをK2莢膜欠失変異株に導入したところ、K2莢膜多糖合成の回復が見られた。それとともに病原性が回復した。又K1莢膜多糖欠失変異株に導入し、K2型莢膜を合成することができた。
5.莢膜多糖合成と関係していると考えられる他の多糖(LPS,EGA)合成に関わるrfb遺伝子、rfe遺伝子を大腸菌よりクローニングした。これらの遺伝子の構造、遺伝子発現の機構について解析することにより、細菌多糖合成機構について知現を得た。
今後、クローニングしたK2莢膜多糖合成遺伝子領域の各機能領域について、それぞれの転写に関わる部位を同定する。更に各領域より合成される蛋白の種類、機能を各クローンからの蛋白合成によって確認する。各クローンの重要な領域について塩基配列を決定する。

Report

(1 results)
  • 1988 Annual Research Report
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    (5 results)

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All Publications (5 results)

  • [Publications] 太田美智男: Bactevial Endotoxin 1988. (1989)

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  • [Publications] 木藤伸夫: Bacterial Endotoxin 1988. (1989)

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  • [Publications] 太田美智男: 医学細菌学. 4. 176-206 (1989)

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  • [Publications] 木藤伸夫: Journal of Bacteviology. 171. (1989)

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  • [Publications] 太田美智男: "遺伝子から見た細菌の病原性" 菜根出版, (1989)

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Published: 1988-04-01   Modified: 2016-04-21  

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