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インスリンにより制御される遺伝子のクローニングと解析

Research Project

Project/Area Number 63570528
Research Category

Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field 内分泌・代謝学
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

柴崎 芳一  東京大学, 医学部, 助手 (80196419)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 山本 律子  東京大学, 医学部, 医員
小田原 雅人  東京大学, 医学部, 医員
春日 雅人  東京大学, 医学部, 助手 (50161047)
Project Period (FY) 1988
Project Status Completed (Fiscal Year 1988)
Budget Amount *help
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1988: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Keywordsインスリン / シグナル伝達 / クローニング
Research Abstract

インスン作用は膜表面の受容体に結合後,糖輸送の促進としてあらわれるばかりでなく,核に作用して特定のmRNAの転写に関与している。我々はどのようなmRNAが増減するかを次の様な方法で検索した。
(結果)(1)in vitro翻訳産物による評価:ラット肝癌細胞H35をインスリン添加前,インスリン10^<-7>M添加後よりmRNAを調製し,ウサギreticulocyte lysateを用いて翻訳産物を作成,二次元に展開して比較した。約1%にあたるスポットが変動を示した。
(2)インスリンに反応するmRNAのcDNA単離:インスリン刺激後のmRNAよりcDNAライブラリーを作成し,前,後のmRNAよりプローブを作成して反応させ,シグナルの変化するクローンを選びだした。
(3)単離クローンによるRNA定量:
得られたクローンのインサートをプローブにしてH35のmRNAを定量してみると,それぞれ予想された増加又は減少を示した。
図にその例を示す
(4)単離クローンの一次構造
インサートをプラスミドに結合して塩基配列を決定して既知の配列と比較すると#479はフェリチンと高い相同性を示し,#448はメタロチオネインと相同性を示した。他は有意な類似はなかった。
(結論)
得られたクローンの中にインスリン作用に重要な役割を持つものが存在する可能性がある。

Report

(1 results)
  • 1988 Annual Research Report
  • Research Products

    (2 results)

All Other

All Publications (2 results)

  • [Publications] Y.Shibasaki: Diabetes. 37. 28A (1988)

    • Related Report
      1988 Annual Research Report
  • [Publications] 柴崎芳一: 日本臨床代謝学会記録(XXV). 196-197 (1988)

    • Related Report
      1988 Annual Research Report

URL: 

Published: 1988-04-01   Modified: 2016-04-21  

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