| Project/Area Number |
63570558
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
|
| Allocation Type | Single-year Grants |
|---|
| Research Field |
Hematology
|
|---|
| Research Institution | University of Tsukuba |
|---|
Principal Investigator |
阿部 帥 筑波大学, 臨床医学系, 教授 (80014215)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
二宮 治彦 筑波大学, 臨床医学系, 講師 (10198533)
中沢 正樹 筑波大学, 臨床医学系, 講師 (60134235)
|
|---|
| Project Period (FY) |
1988
|
| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1988)
|
| Budget Amount *help |
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1988: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
|
|---|
| Keywords | 発作性夜間血色素尿症 / 赤血球 / 溶血 / 補体 / homologous restriction factor. |
|---|
| Research Abstract |
発作性夜間血色素尿症(PNH)は、後天的に出現した補体感受性の高い赤血球がdecay-accelerating factor(DAF:C3分解酵素を失活する)およびhomologous restriction factor(HRF:C8b-9膜障害複合体を失活する)の欠損により補体感受性が亢進し、溶血するものと考えられている。われわれはこれまでの研究でELISA法および組織化学染色・測光法による血球DAFの測定法を開発し、本症における意義を明らかにした。しかしながら本症の血球におけるHRFの欠損の程度およびその意義はほとんど明らかにされていない。本研究ではHRFのELISA法による測定法を開発し、本症の血球におけるHRF欠損の意義を検討した。
方法および結果 (1)プールしたヒト赤血球膜のghostからZalmanの方法により抽出、分画しHRF活性を有する分画を用いてモノクロナル抗体を作成した。(2)このモノクロナル抗体とghostを用いてSDS Pageでwestern blottingを行なった。その結果、PNH赤血球膜のghostにはHRFは存在しないことが証明された。(3)われわれが開発したELISAによるDAFの測定法(二宮法)に準じてHRFの測定法を開発した。HRFは4例のPNH症例全例において欠損が認められ、その程度はDAFの欠損の程度とほぼ平行することが明らかとなった。(4)赤血球DAFの染色法(二宮)に準じて免疫細胞化学法によりHRFを測定した。PNH4例においてHRFの欠損赤血球の割合はDAF欠損率とほぼ平行して認められた。またPNHの重症度に応じて欠損率の高値が認められた。(5)FACSを用いて赤血球のHRF欠損populationを検討すると、PNHに重症度に応じて欠損populationが大きいこと、およびDAF欠損populationにHRFの欠損が認められることが明らかとなった。
結論 以上の成績からPNH赤血球のHRFは重症度およびDAF欠損の程度と平行して欠損している。
|
