| Project/Area Number |
63570794
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| Research Category |
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Obstetrics and gynecology
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| Research Institution | Yokohama City University |
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Principal Investigator |
多賀 理吉 横浜市立大学, 医学部産婦人科, 講師 (00107682)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大塚 尚之 横浜市立大学, 医学部産婦人科, 助手 (70194206)
水口 弘司 横浜市立大学, 医学部産婦人科, 教授 (20010176)
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| Project Period (FY) |
1988 – 1989
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1989)
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| Budget Amount *help |
¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 1989: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
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| Keywords | NGF / 胎児神経系 / tyrosine hydroxylase / mRNA / NGF受容体 / 胎児 / 発育分化 |
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| Research Abstract |
昨年度までは、NGFの受容体およびtyrosine hydroxhlase活性に及ぼすNGFの作用を、ラットの神経組織(とくに神経節)において、そのontogenityに伴う変化をみながら検討した。本年度は、肝仔神経組織におけるNGFをmolecular biologyの側面から検討することを目的とした。
1)NGFmRNA検出用のoligo nucleotide probeの作成。
β-NGFを構成する100番目から116番目までのアミノ酸に対応する塩基配列を選択し、Applied Biosystems Model 380AのDNA合成機によりmRNAに相補的なDNAを合成し、polyacry Comid gel etectrophoresisにより精製後、〔γ-^<32>P〕ATPにて末端をラベルしてpurobeとして。
2)ラット胎仔神経組織におけるmRNAのontogeny
各胎令のラット胎仔の脳を摘出後直ちに液体窒素にて凍結、保存した。crystsstatにて切片作成後、in situ hyfridizationを行う予定であったが、ひと胎盤性NGFについて、まず、このprobeが有用であるか否かを予備実験的に確認することとした。ヒト胎盤にNGFが存在することはこれまでの我々の研究で確認されている。ヒト胎盤からmRNAを抽出して、Nothern blottingを施行すると、1.3kb相当の位置に濃いシグナルが認められ、NGFmRNAによるものと考えられた。したがって、このprobeを用いて、この条件設定の中で、胎仔神経組織でのNGFmRNAのNothern blottingおよびin situ hyfvidizationの実験が可能であることが判明した。
3)ラット胎仔の神経節におけるNGF受容体の変化、およびtyroseine hydroxyCase活性に及ぼすNGFの影響
本年度も、一部追加実験を行ったが、昨年度の結果とほぼ同様であった。
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