• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to previous page

枯草菌における有用遺伝子の新発現制御系の開発

Research Project

Project/Area Number 63616507
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

今中 忠行  大阪大学, 工学部, 教授 (30029219)

Project Period (FY) 1988
Project Status Completed (Fiscal Year 1988)
Budget Amount *help
¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 1988: ¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
Keywordsペニシリナーゼ / 枯草菌 / 遺伝子制御
Research Abstract

我々はBacillus licheniformis ATCC9945a株由来の野生型(誘導性)および構成性ペニシリナーゼ生産株をDNA供与体として、ペニシリナーゼ構造遺伝子(penP)、リプレッサー遺伝子(penI)および酵素誘導に必須の正の制御遺伝子(penJ)をBacillus subtilisおよびB.licheniformisを宿主としてクローニングし、これらを元に種々のpenP分泌ベクターを構築してきた。これらの遺伝子について、塩基配列決定と蛋白の解析により、リプレッサー蛋白(penI、分子量14,983)は128アミノ酸から、penJ蛋白(分子量63,388)は601アミノ酸から成っていることが示された。プロモーターの下流には、典型的なオペレーター配列が存在していた。塩基配列決定の結果、penPとpenI-penJは逆向きの別オペロンを形成していることが明らかになった。更に、penPプロモーターの内部と下流に連続したオペレーター配列が認められたことから、リプレッサーによる厳密な形質発現の抑制が予想された。我々はリプレッサーを精製したのち、オペレーターとの結合をゲルシフトアッセイにより確認した。さらに部位特異的変異処理によち、オペレーターの2回転対称性を失わせたところ、リプレッサー蛋白の生産量が増大すると共にペニシリナーゼ発現がより強く抑制されていることが認められた。さらに部位特異的変異により数種の温度感受性リプレッサーを作成し、ペニシリナーゼ発現制御系への利用を検討した。特にPro70→Leu70の変異リプレッサーは温度感受性が高く、30℃と48℃での酵素誘導比は約44倍にも達した。また、セファロスポリンCによる最大誘導には2〜3時間を要するが、温度シフトによる誘導では1時間以内であり、その即応性が明らかになった。

Report

(1 results)
  • 1988 Annual Research Report
  • Research Products

    (5 results)

All Other

All Publications (5 results)

  • [Publications] T.Imanaka・T.Tanaka・H.Tsunekawa・S.Aiba: J.Bacteriol. 147. 776-786 (1981)

    • Related Report
      1988 Annual Research Report
  • [Publications] T.Imanaka・T.Himeno・S.Aiba: J.Gen.Microbiol.131. 1753-1763 (1985)

    • Related Report
      1988 Annual Research Report
  • [Publications] T.Himeno・T.Imanaka・S.Aiba: J.Bacteriol.168. 1128-1132 (1986)

    • Related Report
      1988 Annual Research Report
  • [Publications] T.Imanaka・T.Himeno・S.Aiba: J.Bacteriol.169. 3867-3872 (1987)

    • Related Report
      1988 Annual Research Report
  • [Publications] T.Imanaka・M.Nakae・T.Ohta: Appl.Environ.Microbiol.(1989)

    • Related Report
      1988 Annual Research Report

URL: 

Published: 1988-04-01   Modified: 2016-04-21  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi