アセチルコリン合成酵素遺伝子の構造と発現調節機構の解明

Research Project

Project/Area Number	63639507
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Allocation Type	Single-year Grants
Research Institution	Kyoto Sangyo University
Principal Investigator	伊東信行京都産業大学, 国土利用開発研究所, 助教授 (10110610)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	黒坂光京都産業大学, 国土利用開発研究所, 講師 (90186536)
Project Period (FY)	1988
Project Status	Completed (Fiscal Year 1988)
Budget Amount *help	¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000) Fiscal Year 1988: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
Keywords	アセチルコリン合成酵素 / Drosophila / 遺伝子 / 塩基配列
Research Abstract	1.アセチルコリン合成酵素cDNAの構造解析 full-lengthのアセチルコリン合成酵素cDNAを単離する目的で、部分cDNAをプローブとして、Drosophila頭部cDNAライブラリーをスクリーニングし、5つのクローンを得た。そのうち、最長のサイズのcDNA(約3.6Kbp)について塩基配列を決定したところ、このcDNAはポリ(A)構造を含む完全な3′非翻訳配列が明らかになったが、翻訳配列については、先に単離したcDNAとはほとんど同一であり、開始コドンは見出されなかった。さらに、5′末端側の構造を明らかにする目的で、再クスリーニングを行っている。 2.抗アセチルコリン合成酵素単クローン抗体が交叉反応性を示す遺伝子産物について抗アセチルコリン合成酵素単クローン抗体はDrosophilaの神経組織(主として、神経網)に特異的に結合することが示されている。Drosophila頭部の全ホモジネートをWestern analysisしたところ、この単クローン抗体はアセチルコリン合成酵素以外にも約150Kダルトンのタンパク質にも強く結合することが明らかになった。この150Kのタンパク質も神経組織特異的タンパク質と期待され、その実体を明らかにする目的で、この150Kタンパク質をコードしていると期待されるcDNAを単離し、その塩基配列を明らかにした。