Ca^<2+>・燐脂質依存性蛋白質燐酸化酵素(Cキナーゼ)の基質認識について

Research Project

Project/Area Number	63641511
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Allocation Type	Single-year Grants
Research Institution	福井医科大学
Principal Investigator	山村博平福井医科大学, 医学部, 教授 (90030882)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	田中幸枝福井医科大学, 医学部, 教務職員 (10197486) 坂上庸一郎福井医科大学, 医学部, 助手 (00187030) 中村俊一福井医科大学, 医学部, 助手 (40155833) 箸本英吉福井医科大学, 医学部, 助教授 (20116239)
Project Period (FY)	1988
Project Status	Completed (Fiscal Year 1988)
Budget Amount *help	¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000) Fiscal Year 1988: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
Keywords	Cキナーゼ / プロタミン / 燐酸化部位 / フルペイン / 血小板
Research Abstract	イノシトール燐脂質代謝によって活性が発現するCキナーゼは、ホルモン作用における情報伝達酵素として脚光をあびている。また発癌誘発剤であるホルボールエステルがイノシトール燐脂質の代謝とはかかわりなくCキナーゼを活性化することから、Cキナーゼと癌化の関係も注目されている。最近Cキナーゼが従来考えられていたような単一体ではなく複数存在することが、酵素蛋白質並びにCDNAの解析から明らかとなった。脳において見い出されたα、βI、βII、γの4つのタイプからさににδ、ε、ζと少なくとも7種類存在することが報告されており、各細胞において異なったCキナーゼが異なった情報を伝えている可能性も考えられている。現在Cキナーゼの基質として数多くの酵素や蛋白質が同定されているが、in vivoにおいて基質として同定されたものはほとんどない。今年度は我々はCキナーゼのプロタミン硫酸の燐酸化部位について検索した。プロタミン硫酸はin vivoにおいて多数のセリン・スレオニン残基が燐酸化されることは知られているが、いかなる蛋白質燐酸化酵素によるのかは明らかにされていない。またCキナーゼがどのアミノ酸を燐酸化するかは不明であった。牛血小板より精製したCキナーゼ(α、βI、βIIの混在)による構造の明らかとなっている3種のプロタミン硫酸、クルペインY-1、Y-2とZの燐酸化部位について調べた。CキナーゼはCAMP依存性蛋白質燐酸化酵素(Aキナーゼ)と異なり、Y-2とZにおいてはすべてのセリン及びスレオニン残基を燐酸化した。AキナーゼはY-1のセリン残基のみを燐酸化するのに比して、Cキナーゼはセリン、スレオニン残基ともに燐酸化する。現在Y-1のどのセリンとスレオニン残基を燐酸化するか検討中である。このようにCキナーゼはプロタミンのin vivoの燐酸化酵素として有力な候補であることが示されたが、さらに他の生理的基質について明らかにしていきたい。