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膜穿孔タンパク質と熱応答磁性ナノ粒子による環境感応型リポソーム駆動システムの構築

Publicly Offered Research

Project AreaDevelopment of Molecular Robots equipped with sensors and intelligence
Project/Area Number 15H00797
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)

Allocation TypeSingle-year Grants
Review Section Science and Engineering
Research InstitutionSaitama University

Principal Investigator

根本 直人  埼玉大学, 理工学研究科, 教授 (60509727)

Project Period (FY) 2015-04-01 – 2017-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2016)
Budget Amount *help
¥6,500,000 (Direct Cost: ¥5,000,000、Indirect Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2016: ¥3,250,000 (Direct Cost: ¥2,500,000、Indirect Cost: ¥750,000)
Fiscal Year 2015: ¥3,250,000 (Direct Cost: ¥2,500,000、Indirect Cost: ¥750,000)
Keywordsリポソーム / 進化工学 / アメーバー型ロボット / 薬物送達 / ナノマシン / ナノバイオ / ナノ材料 / 生物物理 / 表面・界面物性 / ペプチド / チャネル / 分子ロボティクス / 磁性体ゲル / 界面化学 / ソフトマター
Outline of Annual Research Achievements

分子ロボティクスの段階的進化においてアメーバ型ロボットに注目し、外的環境(温度、物質濃度等)に感応して運動しうる他律ロボット型リポソーム運動システム構築の可能性を検討した。温度感受性ゲル磁性ナノビーズはある特定の温度や塩濃度によって凝集する性質があり、このことによりそれまで分散状態で磁場によって影響を受けない直径100 nmのビーズが凝集することにより500 nm以上に凝集する。このため、熱的なブラウン運動に打ち勝ち重力を含む外場(磁場)により運動するようになる。今回、この温度感受性ゲル磁性ナノビーズをリポソームに封入し、温度依存的環境下でリポソームの運動を観察した。4℃でこのリポソームは外場(磁場)に応じて移動することが確認された。そこで、膜に穴をあける抗菌ペプチドを用いて高濃度の外液の塩をリポソーム内に流入させることで、温度感受性ゲル磁性ナノビーズを凝集させることを試みた。しかし、浸透圧によるリポソームの不安定性が新たな課題となることが分かった。そこで、塩イオンより大きな蛍光分子等を流入することができるような新規の抗菌ペプチドを創製するためのスクリーニングシステムの開発を行い、実際にフルオロセインを流入させることを指標とした選択を行った。その結果、複数の候補ペプチドの取得に成功し、これについて農工大の川野准教授との共同研究を進めている。リポソームの応用を考えるとその表面に任意のタンパク質を固定化することは、薬物送達(DDS)技術として極めて重要である。本研究の応用的な出口として次世代抗体のようなタンパク質を本研究で得られたペプチドを用いて固定化する方法についても検討した。その結果、LB-1ペプチドをタンパク質のC末端に連結することで、リポソームと混合するだけでタンパク質がリポソーム上に固定化することができることを示した。今後、様々な応用が期待されると考えている。

Research Progress Status

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2016 Annual Research Report
  • 2015 Annual Research Report
  • Research Products

    (20 results)

All 2017 2016 2015

All Journal Article (8 results) (of which Peer Reviewed: 7 results,  Open Access: 5 results,  Acknowledgement Compliant: 5 results) Presentation (11 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Invited: 3 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Journal Article] Enhanced mRNA-protein fusion efficiency of a single-domain antibody by selection of mRNA display with additional random sequences in the terminal translated regions2017

    • Author(s)
      Kazuki Takahashi, Masato Sunohara, Takuya Terai, Shigefumi Kumachi and Naoto Nemoto
    • Journal Title

      Biophysics and Physicobiology

      Volume: 14 Issue: 0 Pages: 23-28

    • DOI

      10.2142/biophysico.14.0_23

    • NAID

      130005396150

    • ISSN
      2189-4779
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] In vitro Selection of Random Peptides against Artificial Lipid Bilayers: A Potential Tool to Immobilize Molecules on Membranes2017

    • Author(s)
      Shota Kobayashi, Takuya Terai, Yuki Yoshikawa, Ryoya Ohkawa, Mika Ebihara, Masahito Hayashi, Kingo Takiguchi, and Naoto Nemoto
    • Journal Title

      Chem Commun (Camb)

      Volume: 53 Issue: 24 Pages: 3458-3461

    • DOI

      10.1039/c7cc00099e

    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] An RNA Binding Peptide Consisting of Four Types of Amino Acid by in Vitro Selection Using cDNA Display2016

    • Author(s)
      Shigefumi Kumachi, Yuzuru Husimi, and Naoto Nemoto
    • Journal Title

      ACS Omega

      Volume: 1 Issue: 1 Pages: 52-57

    • DOI

      10.1021/acsomega.6b00015

    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] 膜穿孔タンパク質と熱応答磁性ナノ粒子による環境感応型リポソーム駆動システムの構築2016

    • Author(s)
      根本直人
    • Journal Title

      Molecular Robotics Research Group. Newsletter

      Volume: 17 Pages: 14-14

    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Open Access
  • [Journal Article] cDNAディスプレイによる機能性ペプチドアプタマーの創生2016

    • Author(s)
      根本直人
    • Journal Title

      日本生物工学会誌

      Volume: 94 Pages: 481-484

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      2016 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] 試験管内進化を加速するcDNA display システム2016

    • Author(s)
      熊地重文、根本直人
    • Journal Title

      酵素工学ニュース

      Volume: 76 Pages: 21-25

    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Functional Analysis of Liposome Anchoring Peptide Selected by Complementary DNA display (cDNA display)2015

    • Author(s)
      Naoto Nemoto, Yuki Yoshikawa, Toshiki Miyajima, and Shota Kobayashi
    • Journal Title

      Peptide Science 2014 (Edited by Akira Otaka)

      Volume: 51 Pages: 71-72

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      2015 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] A versatile puromycin-linker using cnvK for high-throughput in vitro selection by cDNA display2015

    • Author(s)
      Yuki Mochizuki, Takeru Suzuki, Kenzo Fujimoto, Naoto Nemoto
    • Journal Title

      Journal of Biotechnology

      Volume: 212 Pages: 174-180

    • DOI

      10.1016/j.jbiotec.2015.08.020

    • Related Report
      2015 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] ハイスループット淘汰技術を用いた配列空間探査による新機能分子(ネオバイオ分子)の創製2016

    • Author(s)
      根本 直人
    • Organizer
      第39回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜(神奈川県横浜市)
    • Year and Date
      2016-11-30
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
  • [Presentation] リポソームとFACSを用いたSELEX法によるRNAアプタマーのハイスループットスクリーニング2016

    • Author(s)
      松川 優太,熊地 重文,蛯原 三華,濱田 枝里,中井 淳一,根本 直人
    • Organizer
      第39回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜(神奈川県横浜市)
    • Year and Date
      2016-11-30
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
  • [Presentation] リポソームへの簡易なタンパク質固定化のためのリポソーム結合ペプチド配列2016

    • Author(s)
      大川 僚也,根本 直人,小林 省太,宮嶋 俊樹
    • Organizer
      第39回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜(神奈川県横浜市)
    • Year and Date
      2016-11-30
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
  • [Presentation] FACSを用いたペプチドアプタマーの高速スクリーニングシステムの開発2016

    • Author(s)
      濱田 枝里,熊地 重文,松川 優太,蛯原 三華,中井 淳一,藤本 健造,根本 直人
    • Organizer
      第39回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜(神奈川県横浜市)
    • Year and Date
      2016-11-30
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
  • [Presentation] Magnetically-driven moving liposomes that sense environmental information2016

    • Author(s)
      Mika Ebihara, Taro Toyota, Naoto Nemoto
    • Organizer
      第54回日本生物物理学会年会
    • Place of Presentation
      つくば国際会議場(茨城県つくば市)
    • Year and Date
      2016-11-24
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
  • [Presentation] cDNA display method and its applications for the in vitro selection of functional peptides2016

    • Author(s)
      根本 直人
    • Organizer
      第68回日本生物工学会大会
    • Place of Presentation
      富山国際会議場(富山県富山市)
    • Year and Date
      2016-09-26
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] ゆらぎ・進化・生体高分子― 実験室内進化実験から見た生体高分子 -2016

    • Author(s)
      根本直人
    • Organizer
      第2回若手勉強会「ソフトマター若手勉強会」
    • Place of Presentation
      東京大学検見川セミナーハウス、千葉県千葉市花見川区
    • Year and Date
      2016-03-11
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] 人工脂質二重膜結合ペプチドの試験管内淘汰とその応用2015

    • Author(s)
      根本 直人, 大川 僚也, 吉川 祐紀, 宮嶋 俊樹, 小林 省太
    • Organizer
      第38回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      神戸国際会議場、兵庫県神戸市
    • Year and Date
      2015-12-02
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] In Vitro Selection of Liposome Anchoring Peptide by cDNA display2015

    • Author(s)
      Naoto Nemoto, Ryouya Okawa, Yuki Yoshikawa, Toshiki Miyajima, Shota Kobayasi
    • Organizer
      第53回日本生物物理学会年会
    • Place of Presentation
      金沢大学、石川県金沢市
    • Year and Date
      2015-09-24
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
  • [Presentation] In Vitro Selection of Liposome Anchoring Peptide by cDNA display2015

    • Author(s)
      Naoto Nemoto, Ryoya Okawa, Yuki Yoshikawa, Toshiki Miyajima, , Shota Kobayashi
    • Organizer
      The 29th Annual Symposium of The Protein Society
    • Place of Presentation
      Barcelona (Spain)
    • Year and Date
      2015-07-22
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] リポソームに穴を開けよう: ペプチドによる進化的アプローチ2015

    • Author(s)
      根本直人
    • Organizer
      新学術「ゆらぎと構造」+「分子ロボティクス」合同研究会
    • Place of Presentation
      東京大学(本郷キャンパス)東京都文京区
    • Year and Date
      2015-06-25
    • Related Report
      2015 Annual Research Report
    • Invited
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 非天然アミノ酸含有ペプチドライブラリ2016

    • Inventor(s)
      根本直人、照井直樹
    • Industrial Property Rights Holder
      埼玉大学
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      2016-115257
    • Filing Date
      2016-06-09
    • Related Report
      2016 Annual Research Report

URL: 

Published: 2015-04-16   Modified: 2018-03-28  

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