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細胞内アクチン繊維及び再構成アクチン繊維の動的構造変化の検出

Publicly Offered Research

Project AreaHarmonized supramolecular machinery for motility and its diversity
Project/Area Number 15H01325
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)

Allocation TypeSingle-year Grants
Review Section Biological Sciences
Research InstitutionKyushu Institute of Technology

Principal Investigator

安永 卓生  九州工業大学, 大学院情報工学研究院, 教授 (60251394)

Project Period (FY) 2015-04-01 – 2017-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2016)
Budget Amount *help
¥5,980,000 (Direct Cost: ¥4,600,000、Indirect Cost: ¥1,380,000)
Fiscal Year 2016: ¥2,990,000 (Direct Cost: ¥2,300,000、Indirect Cost: ¥690,000)
Fiscal Year 2015: ¥2,990,000 (Direct Cost: ¥2,300,000、Indirect Cost: ¥690,000)
Keywords糸状仮足 / 細胞運動 / アクチン繊維 / ファシン / フィロポディア / 神経細胞 / クライオ電子顕微鏡法 / 電子線トモグラフィー法 / アクチン / 電子顕微鏡 / クライオ電子顕微鏡 / 細胞 / アクチン繊維束
Outline of Annual Research Achievements

細胞内及び再構成アクチン繊維を対象として、細胞運動に関わるその構造変化を捉える事を目的とるいして研究を進めた。フィロポディアは細胞運動の中で、細胞の運動の方向性を決定づける細胞内装置のひとつである。そこで、クライオ電子線トモグラフィー法を使い、神経細胞のフィロポディア(糸状仮足)の内部のアクチン繊維束の動態を、三次元構造としてナノメータ分解能で明らかにした。
その結果、約30本のアクチン繊維を単位としてフィロポディアが出来上がっていること、その束化因子であるファシンはアクチン繊維に周期的に、かつ、協働的に結合していることが分かった。更に、三次元構造の平均化を行い、架橋しているファシンの3-4ナノメータの分解能での構造を解き、三種類の結合部位を2:1の組とし、それぞれが隣り合ったアクチン繊維い結合し、架橋していることが分かった。そのうち、アクチン繊維束周辺では、隣にアクチン繊維がない場合でも、2つの結合部位側を利用して、アクチン繊維から周期正しく結合していることが観察された。このことは、アクチン繊維束を超えた協働的なアクチンの構造変化を示唆している。これらの結果から、フィロポディア内部におけるアクチン繊維束の形成メカニズムについて新たに提案する事ができた。
現在、更に、アクチン繊維の形成が誘導されているフィロポディア先端の構造解析を進め、その形状の違いを確認したところである。
上記以外に、継続中の研究として、第一に、査型電子顕微鏡を使い、毛乳頭細胞の三次元培養状態における細胞動態の観察手法を確立した。第二に、再構成アクチンフィラメントについて、ミオシンの結合有無、リガンドであるヌクレオチドによるアクチンフィラメントの構造変化を捉えることに成功している。これらは、更に、確度と精度を上げるべく継続的に研究を進めている。

Research Progress Status

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2016 Annual Research Report
  • 2015 Annual Research Report
  • Research Products

    (6 results)

All 2017 2016 Other

All Journal Article (2 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Peer Reviewed: 2 results,  Open Access: 2 results,  Acknowledgement Compliant: 1 results) Presentation (2 results) (of which Invited: 2 results) Remarks (2 results)

  • [Journal Article] Katanin p80, NuMA and cytoplasmic dynein cooperate to control microtubule dynamics2017

    • Author(s)
      Mingyue Jin, Oz Pomp, Tomoyasu Shinoda, Shiori Toba, Takayuki Torisawa, Ken’ya Furuta, Kazuhiro Oiwa, Takuo Yasunaga, Daiju Kitagawa, Shigeru Matsumura, Takaki Miyata, Thong Teck Tan, Bruno Reversade & Shinji Hirotsune
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 7 Issue: 1 Pages: 39902-39902

    • DOI

      10.1038/srep39902

    • NAID

      120005997787

    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Filopodia Formation by Cross‐linking of F‐actin with Fascin in Two Different Binding Manners2016

    • Author(s)
      S. Aramaki, K. Mayanagi, M. Jin, K. Aoyama, T. Yasunaga
    • Journal Title

      Cytoskeleton

      Volume: 73 Issue: 7 Pages: 365-74

    • DOI

      10.1002/cm.21309

    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] クライオ電子顕微鏡法による運動性タンパク質の可視化2016

    • Author(s)
      安永卓生
    • Organizer
      日本蛋白質科学会・年会
    • Place of Presentation
      福岡
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] 新型高圧 凍結装置を用いたクライオワーク フロー、及びCryo CLEM法の 活用と課題2016

    • Author(s)
      安永卓生
    • Organizer
      日本顕微鏡学会・学術講演会
    • Place of Presentation
      仙台
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Invited
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.yasunaga-lab.bio.kyutech.ac.jp/

    • Related Report
      2016 Annual Research Report
  • [Remarks] 安永研究室HP

    • URL

      http://www.yasunaga-lab.bio.kyutech.ac.jp/

    • Related Report
      2015 Annual Research Report

URL: 

Published: 2015-04-16   Modified: 2018-03-28  

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