肺炎マイコプラズマの接着滑走マシナリーの微細構造解明と構成タンパク質の構造解析
Publicly Offered Research
| Project Area | Harmonized supramolecular machinery for motility and its diversity |
|---|
| Project/Area Number |
15H01337
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
|
| Allocation Type | Single-year Grants |
|---|
| Review Section |
Biological Sciences
|
|---|
| Research Institution | National Institute of Infectious Diseases |
|---|
Principal Investigator |
見理 剛 国立感染症研究所, 細菌第二部, 室長 (80270643)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2017-03-31
|
| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2016)
|
| Budget Amount *help |
¥11,310,000 (Direct Cost: ¥8,700,000、Indirect Cost: ¥2,610,000)
Fiscal Year 2016: ¥5,850,000 (Direct Cost: ¥4,500,000、Indirect Cost: ¥1,350,000)
Fiscal Year 2015: ¥5,460,000 (Direct Cost: ¥4,200,000、Indirect Cost: ¥1,260,000)
|
|---|
| Keywords | Mycoplasma pneumoniae / 肺炎マイコプラズマ / 細胞接着 / 滑走運動 / 接着器官 / P1 タンパク質 / 構造解析 / 細胞骨格 / タンパク質構造解析 / 蛍光タンパク質 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
肺炎マイコプラズマの細胞接着と滑走運動を担う P1 タンパク質の構造解析を進めるため、組換え P1 の生産条件を改良した。改良した条件では、大腸菌培養液 1 リットルあたり、1～1.5 mg 程度の高純度な組換え P1 が精製でき、10～20 mg/ml の濃縮 P1 サンプルが大量調製できようになった。このサンプルを使用し大規模な結晶化スクリーニングを行ったが、X線結晶解析を行えるような P1 結晶は得られなかった。現時点で P1 結晶を得ることはできなかったが、X線小角散乱法（SAXS）による分析では、組換え P1 は球状の単量体で、コンパクトな形状をしており、今後結晶化条件が見つかる可能性はあると考えられる。P1 にはアミノ酸配列が少し異なるサブタイプがいくつか知られている。本研究課題では 1 型の P1 について結晶化の試みを続けてきたが、2a 型の P1 についても、今後結晶化を試みるため発現系を構築した。組換え P1 について領域内の共同研究でクライオ電顕による単粒子解析も進めた。
一方、肺炎マイコプラズマの HMW2 は 216 kDa の細胞骨格タンパク質で、coiled-coil モチーフに富んでいる。HMW2 は肺炎マイコプラズマの接着器官の形成と維持に必須な細胞骨格（core 構造）の主成分だと考えられている。HMW2 は N末端を細胞の外側、C末端を内側に向ける配置で平行に会合し core 構造を形成していると考えられる。今回 HMW2 の coiled-coil モチーフ領域を欠失または重複させることによって、肺炎マイコプラズマの細胞内で core 構造の長さを 変化させられるようになった。Core 構造の長さが異なることよって、肺炎マイコプラズマの滑走運動性がどのように変化するのか詳しく解析している。
|
| Research Progress Status |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
|
| Strategy for Future Research Activity |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
|
Report
(2 results)
Research Products
(16 results)
-
[Journal Article] Inter- and intra-strain variability of tandem repeats in Mycoplasma pneumoniae based on next-generation sequencing data2017
Author(s)
Zhang J, Song X, Ma MJ, Xiao L, Kenri T, Sun H, Ptacek T, Li S, Waites KB, Atkinson TP, Shibayama K, Dybvig K, Feng Y
-
Journal Title
Future Microbiol.
Volume: 12
Issue: 2
Pages: 119-129
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
-
-
-
-
-
-
[Presentation] Novel sequence variations in the cytadherence-related orf6 gene of Mycoplasma pneumoniae2016
Author(s)
Tsuyoshi Sekizuka, Masato Suzuki, Atsuko Horino, Hiroyuki Fujii, Toru Hashimoto, Hiroshi Nakajima, Hitomi Ohya, Shigetarou Mori, Makoto Kuroda, Keigo Shibayama, Tsuyoshi Kenri
Organizer
21st Congress of the International Organization for Mycoplasmology
Place of Presentation
Brisbane, Australia
Year and Date
2016-07-03
Related Report
Int'l Joint Research
-
[Presentation] Structure and function of P1 adhesin, the leg for Mycoplasma pneumoniae gliding2016
Author(s)
U Matsumoto, Yoshito Kawakita, Tsuyoshi Kenri, Shigetaro Mori, Miki Kinoshita, Akihiro Kawamoto, Takayuki Kato, Keiichi Namba, Makoto Miyata
Organizer
21st Congress of the International Organization for Mycoplasmology
Place of Presentation
Brisbane, Australia
Year and Date
2016-07-03
Related Report
Int'l Joint Research
-
-
-
[Presentation] Structure and function of P1 adhesin, leg in Mycoplasma pneumoniae gliding2016
Author(s)
松本 優, 川北 祥人, 見理 剛, 森 茂太郎, 浜口 祐, 木下 実紀, 川本 晃大, 加藤 貴之, 難波 啓一, 宮田 真人
Organizer
日本細菌学会
Place of Presentation
大阪
Year and Date
2016-03-23
Related Report
-
-
-
-
-
