腫瘍関連マクロファージ形成における低酸素及び活性酸素感受性TRPチャネルの関与

Publicly Offered Research

Project Area	Oxygen biology: a new criterion for integrated understanding of life
Project/Area Number	15H01409
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
Allocation Type	Single-year Grants
Review Section	Biological Sciences
Research Institution	Teikyo Heisei University
Principal Investigator	清水俊一帝京平成大学, 薬学部, 教授 (60196516)
Project Period (FY)	2015-04-01 – 2017-03-31
Project Status	Completed (Fiscal Year 2016)
Budget Amount *help	¥5,720,000 (Direct Cost: ¥4,400,000、Indirect Cost: ¥1,320,000) Fiscal Year 2016: ¥2,860,000 (Direct Cost: ¥2,200,000、Indirect Cost: ¥660,000) Fiscal Year 2015: ¥2,860,000 (Direct Cost: ¥2,200,000、Indirect Cost: ¥660,000)
Keywords	マクロファージの極化 / TRPM2 / 固形癌 / 単球 / TRPM2阻害剤 / 活性酸素 / 低酸素 / TRPチャネル / 腫瘍 / マクロファージ / TRPA1 / TRPV1 / 腫瘍形成
Outline of Annual Research Achievements	マクロファージは単球から分化する細胞で、腫瘍にはM1マクロファージとM2マクロファージが集積し、特にM2マクロファージは腫瘍の成長に有利な環境を構築する。我々は、これまでに活性酸素感受性チャネルであるTRPM2欠損 (KO) マウスでは、腫瘍の成長が抑制されることを見出している。そこで、平成２８年度は、TRPM2チャネルの役割に焦点を当て研究を行った。野生型 (WT) マウスとTRPM2 KO マウスの骨髄より調製した単球をマクロファージ (M0)に分化させ、そのM0マクロファージを種々の条件に暴露することによるM2マクロファージへ極化を検討した。WTマクロファージにおいて、IL-4の添加、マウス肺がん細胞の培養上清の添加または低酸素暴露により、M2マクロファージへの極化が認められた。そこで、WTマクロファージとTRPM2 KO マクロファージで比較実験を行ったが、いずれの実験条件でも差は認められなかった。TRPM2は、活性酸素感受性チャネルである。そこで、さらに過酸化水素の添加実験を行ったが、WTマクロファージのM2マクロファージへの極化は認められなかった。以上の結果より、M0マクロファージのM2マクロファージの極化には、TRPM2の関与はないとの結論に至った。我々は、近年TRPM2活性の阻害物質としてtyrphostin AG関連化合物を見出している。そこで、ヒト単球系細胞株U937細胞を用いて、過酸化水素刺激によるTRPM2を介したサイトカイン分泌及び細胞死に対するtyrphostin AG関連化合物の効果を検討した。その結果、tyrphostin AG関連化合物はサイトカイン分泌を抑制するが、細胞死には影響しないことが明らかとなった。Tyrphostin AG関連化合物は、活性酸素感受性チャネルTRPM2の機能解析に有用であると考えられる。
Research Progress Status	28年度が最終年度であるため、記入しない。
Strategy for Future Research Activity	28年度が最終年度であるため、記入しない。