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SHG専用色素を用いたマルチモダル2光子顕微鏡の開発と応用

Publicly Offered Research

Project AreaResonance Biology for Innovative Bioimaging
Project/Area Number 16H01434
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)

Allocation TypeSingle-year Grants
Review Section Biological Sciences
Research InstitutionKeio University

Principal Investigator

塗谷 睦生  慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 准教授 (60453544)

Project Period (FY) 2016-04-01 – 2018-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2017)
Budget Amount *help
¥10,010,000 (Direct Cost: ¥7,700,000、Indirect Cost: ¥2,310,000)
Fiscal Year 2017: ¥5,070,000 (Direct Cost: ¥3,900,000、Indirect Cost: ¥1,170,000)
Fiscal Year 2016: ¥4,940,000 (Direct Cost: ¥3,800,000、Indirect Cost: ¥1,140,000)
Keywords光第二高調波発生 / SHG / 2光子顕微鏡 / マルチモダル / 多光子顕微鏡 / グリア細胞 / アストロサイト
Outline of Annual Research Achievements

光第二高調波発生(Second Harmonic Generation: SHG)は蛍光とは異なる2光子現象であり、その可視化により独自の情報の獲得が可能となる。しかし、ライフサイエンスの分野においては応用の試みが十分になされてこなかった。このような現状を打開しSHGイメージングのバイオイメージングにおける有用性を探求すべく、他の多光子現象との同時観測によるマルチモダル2光子顕微鏡観測を可能とするSHG専用色素の開発と応用を行った。
これまでの解析から、我々が開発した無蛍光性SHG専用色素Ap3を用いることにより、2光子励起蛍光とSHGを同時かつ独立に可視化する、マルチモダル多光子顕微鏡観測が可能となることが確かめられた。特に、Ap3を用いたSHGイメージングは細胞の形質膜の特異的可視化に非常に有用であることが明らかとなった。そこでSHG専用色素を用いたSHGイメージングの生命科学研究への更なる応用性を模索するため、他の非線形光学現象であるCoherent Anti-Stokes Raman Scattering(CARS)との併用を試みた。ここから、Ap3はCARSの系にて用いられる、二つの異なる波長のレーザー光の同時照射に応じた和周波発生(Sum Frequency Generation:SFG)シグナルを非常に強く発生することが明らかとなった。つまり、Ap3はSHGのみならず和周波発生一般に応用可能であり、これを利用することで蛍光やラマン散乱とのマルチモダル多光子顕微鏡観察が実現することが明らかとなった。これらのマルチモダル多光子顕微鏡を用いることで、複雑に入り組んだ複数の生命現象の同時可視化解析が可能となると期待される。

Research Progress Status

29年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

29年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2017 Annual Research Report
  • 2016 Annual Research Report
  • Research Products

    (13 results)

All 2018 2017 2016 Other

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 2 results,  Acknowledgement Compliant: 2 results,  Open Access: 1 results) Presentation (5 results) (of which Invited: 5 results) Book (1 results) Remarks (2 results)

  • [Journal Article] 多光子顕微鏡法のためのSHG専用色素2017

    • Author(s)
      塗谷睦生
    • Journal Title

      生体の科学

      Volume: 68 Pages: 424-425

    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Journal Article] 第二高調波顕微鏡~生体機能解明への挑戦~2017

    • Author(s)
      塗谷睦生
    • Journal Title

      光アライアンス

      Volume: 28 Pages: 37-43

    • NAID

      40021369589

    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Journal Article] Background norepinephrine primes astrocytic calcium responses to subsequent norepinephrine stimuli in the cerebral cortex.2017

    • Author(s)
      Nuriya M, Takeuchi M and Yasui M.
    • Journal Title

      Biochem Biophys Res Commun.

      Volume: 483 Issue: 1 Pages: 732-738

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2016.12.073

    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Multimodal two-photon imaging using a second harmonic generation-specific dye2016

    • Author(s)
      Mutsuo Nuriya, Shun Fukushima, Atsuya Momotake, Takanori Shinotsuka, Masato Yasui & Tatsuo Arai
    • Journal Title

      Nature Communications

      Volume: - Issue: 1 Pages: 11557-11557

    • DOI

      10.1038/ncomms11557

    • NAID

      120007135505

    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] 光第二高調波顕微鏡の細胞生物学研究への応用2016

    • Author(s)
      塗谷睦生
    • Journal Title

      OPTRONICS

      Volume: 35(8) Pages: 69-73

    • Related Report
      2016 Annual Research Report
  • [Presentation] 光第二高調波イメージングの細胞生物学研究への応用2017

    • Author(s)
      塗谷睦生
    • Organizer
      第55回日本生物物理学会年会
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    • Invited
  • [Presentation] 光第二高調波イメージングの細胞生物学研究への応用2017

    • Author(s)
      塗谷睦生
    • Organizer
      日本顕微鏡学会 先端光学顕微鏡分科会 ワークショップ
    • Place of Presentation
      東京大学医学部教育研究棟(東京都文京区)
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  • [Presentation] 光第二高調波顕微鏡の生体機能解明への応用2017

    • Author(s)
      塗谷睦生
    • Organizer
      光材料・応用技術研究会
    • Place of Presentation
      中央大学 理工学部 後楽園キャンパス(東京都文京区)
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  • [Presentation] 光第二高調波発生イメージングの細胞生物学研究への応用2016

    • Author(s)
      塗谷睦生
    • Organizer
      第305回光エレクトロニクス第130委員会研究会
    • Place of Presentation
      東京理科大学 森戸記念館(東京都新宿区)
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      2016 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] 光第二高調波顕微鏡の細胞生物学研究への応用2016

    • Author(s)
      塗谷睦生
    • Organizer
      月刊オプトロニクス特集連動特別セミナー
    • Place of Presentation
      飯田橋レインボービル会議室(東京都新宿区)
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    • Invited
  • [Book] ライフサイエンス顕微鏡ハンドブック2018

    • Author(s)
      山科正平・高田邦昭責任編集
    • Total Pages
      344
    • Publisher
      朝倉書店
    • ISBN
      9784254310948
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  • [Remarks] 塗谷グループのホームページ

    • URL

      http://user.keio.ac.jp/~aa606547/homepage.html

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  • [Remarks] 塗谷グループホームページ

    • URL

      http://user.keio.ac.jp/~aa606547/homepage.html

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      2016 Annual Research Report

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Published: 2016-04-26   Modified: 2018-12-17  

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