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蛋白質機能を駆動する水和構造の時空間階層イメージング

Publicly Offered Research

Project AreaNovel measurement techniques for visualizing 'live' protein molecules at work
Project/Area Number 17H05891
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)

Allocation TypeSingle-year Grants
Review Section Complex systems
Research InstitutionKeio University

Principal Investigator

中迫 雅由  慶應義塾大学, 理工学部(矢上), 教授 (30227764)

Project Period (FY) 2017-04-01 – 2019-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2018)
Budget Amount *help
¥6,500,000 (Direct Cost: ¥5,000,000、Indirect Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2018: ¥3,250,000 (Direct Cost: ¥2,500,000、Indirect Cost: ¥750,000)
Fiscal Year 2017: ¥3,250,000 (Direct Cost: ¥2,500,000、Indirect Cost: ¥750,000)
Keywords蛋白質水和構造 / 蛋白質内部運動 / X線小角散乱 / クライオ電子顕微鏡 / 動的ストークスシフト / 時間分解蛍光 / 分子動力学計算 / 植物光受容蛋白質 / 蛋白質ドメイン運動 / 水和ダイナミクス / クライオ電子顕微鏡解析 / 時間分解蛍光測定 / 蛋白質水和 / ドメイン運動 / 光受容蛋白質 / 立体構造 / 生物物理 / 電子顕微鏡
Outline of Annual Research Achievements

本課題では、溶液中の蛋白質機能発現過程での分子及び溶媒和ダイナミクスを探る研究を行っている。これまで、グルタミン酸脱水素酵素のドメイン運動を結晶構造解析と分子動力学計算によって明らかにしてきた。前年度に引き続き、より多数の電子顕微鏡画像データを追加して、実験的にドメイン運動の準安定状態を探った。その結果、運動が制限される結晶構造解析では観察できない溶液中での構造多形を見出した。さらに、分子動力学計算結果と照合したところ、観察された各準安定状態が、分子動力学計算で現れる構造揺らぎの範囲内にあるものの、その出現頻度は大きく異なっていた。この結果は、200 ns程度の分子動力学計算では、分子運動の位相空間を十分にサンプリングできないことを意味する。これらの成果をまとめて、現在、論文投稿中である。
溶液中蛋白質分子の構造変化を調べるために、植物の赤色光受容蛋白質フィトクロムBの全長試料について、排除体積クロマトグラフィーとX線小角散乱を組み合わせた測定を行った。赤色光吸収型の分子形状モデルをこれまでに開発した解析方法で明らかにし、類縁蛋白質フィトクロムAとの構造差異も明らかにした。また、赤色光照射下で、赤色光吸収型と近赤外光吸収型の混合状態についても測定し、生理活性を有する近赤外光吸収型が光科学的に非特異的凝集を生じることを明らかにした。この光依存的凝集は、近赤外光吸収型が他の蛋白質と相互作用する際に有利に働き、生理活性を生じるのではないかと推察した。この成果についても、現在、論文投稿中である。
前年度に時間分解蛍光和周波測定で得られたダイナミック・ストークス・シフトのデータを、分子動力学計算によって解釈することを試み、蛋白質表面に生じる集団的な水和双極子が、トリプトファンの電子状態緩和に寄与することを明らかにした。この結果は、論文としてまとめて投稿し、現在、改訂中である。

Research Progress Status

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2018 Annual Research Report
  • 2017 Annual Research Report
  • Research Products

    (18 results)

All 2018 2017

All Journal Article (8 results) (of which Peer Reviewed: 8 results,  Open Access: 1 results) Presentation (8 results) (of which Invited: 2 results) Book (2 results)

  • [Journal Article] Classification of ab initio models of proteins restored from small-angle X-ray scattering2018

    • Author(s)
      Mao Oide, Yuki Sekiguchi, Asahi Fukuda, Koji Okajima, Tomotaka Oroguchi, Masayoshi Nakasako
    • Journal Title

      Journal of Synchrotron Radiation

      Volume: 25 Issue: 5 Pages: 1379-1388

    • DOI

      10.1107/s1600577518010342

    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Growth of cuprous oxide particles in liquid-phase synthesis investigated by X-ray laser2018

    • Author(s)
      Tomotaka Oroguchi, Takashi Yoshidome, Takahiro Yamamoto, Masayoshi Nakasako
    • Journal Title

      Nano Letters

      Volume: 18 Issue: 8 Pages: 5192-5197

    • DOI

      10.1021/acs.nanolett.8b02153

    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 水和構造によって制御される蛋白質の機能的ドメイン運動2018

    • Author(s)
      苙口友隆,中迫雅由
    • Journal Title

      生物物理

      Volume: 58 Pages: 204-206

    • NAID

      130007420866

    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Blue-light excited LOV1 and LOV2 domains cooperatively regulate the kinase activity of full-length phototropin2 from Arabidopsis2018

    • Author(s)
      M. Oide, K. Okajima, H. Nakagami, T. Kato, Y. Sekiguchi, T. Oroguchi, T. Hikima, M. Yamamoto and M. Nakasako
    • Journal Title

      The Journal of Biological Chemistry

      Volume: 293 Issue: 3 Pages: 963-972

    • DOI

      10.1074/jbc.ra117.000324

    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 水和構造によって制御される蛋白質の機能的ドメイン運動2018

    • Author(s)
      苙口友隆、中迫雅由
    • Journal Title

      生物物理

      Volume: 印刷中

    • NAID

      130007420866

    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Influences of lone-pair electrons on directionality of hydrogen bonds formed by hydrophilic amino acids side chains in molecular dynamics simulation2017

    • Author(s)
      T. Oroguchi and M. Nakasako
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 7 Issue: 1 Pages: 15859-15859

    • DOI

      10.1038/s41598-017-16203-w

    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Controlled Terahertz Birefringence in Stretched Poly(lactic acid) Films Investigated by Terahertz Time-Domain Spectroscopy and Wide-Angle X-ray Scattering2017

    • Author(s)
      H. Iwasaki、M. Nakamura、N. Komatsubara、M. Okano、M. Nakasako、H. Sato、S. Watanabe
    • Journal Title

      Journal of Physical Chemistry B

      Volume: 121 Issue: 28 Pages: 6951-6957

    • DOI

      10.1021/acs.jpcb.7b04755

    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A protocol for searching most probable phase-retrieved maps in coherent X-ray diffraction imaging by exploiting relationship between convergence of retrieved phase and success of calculation2017

    • Author(s)
      Y. Sekiguchi, S. Hashimoto, A. Kobayashi, T. Oroguchi and M. Nakasako
    • Journal Title

      Journal of Synchrotron Radiation

      Volume: 24 Issue: 5 Pages: 1024-1038

    • DOI

      10.1107/s1600577517008396

    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 量子ビームを用いる細胞の空間階層イメージング2018

    • Author(s)
      中迫雅由
    • Organizer
      平成30年度 東北大学多元物質科学研究所 附属先端計測開発センター講演会 第2回「計測とデータ科学の協奏」
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] Domain motion of Fv-fragment in anti-dansyl immunoglobulin G controles conofromation of its flexible antigen-binding region2018

    • Author(s)
      T. Oroguchi and M. Nakasako
    • Organizer
      第56回日本生物物理学会年会
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] Visualizing the domain motion of glutamate dehydrogenase using cryo-electron microscopy2018

    • Author(s)
      M. Oide, T. Kato, T. Oroguchi, K. Namba and M. Nakasako
    • Organizer
      第56回日本生物物理学会年会
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] クライオ電子顕微鏡を用いたグルタミン酸脱水素酵素ドメイン運動の解析2018

    • Author(s)
      大出 真央、加藤 貴之、苙口 友隆、難波 啓一、中迫 雅由
    • Organizer
      第18回日本タンパク質科学会年会
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] クライオ電子顕微鏡法で取得された蛋白質三次元構造に 対するX線小角散乱法を利用した構造評価方法の提案2018

    • Author(s)
      大出真央、加藤貴之、苙口友隆、引間孝明、難波啓一、山本雅貴、中迫雅由
    • Organizer
      第31回日本放射光学会年会・放射光科学合同シンポジウム
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Presentation] Measurement of dynamic Stokes shift of lysozyme and its interpretation by molecular dynamics simulation2017

    • Author(s)
      A. Fukuda, T. Oroguchi, M. Nakasako
    • Organizer
      第55回生物物理学会年会
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Presentation] Cryo-electron microscopy study toward detecting domain motion of glutamate dehydrogenase2017

    • Author(s)
      Oide, T. Kato, T. Oroguchi, K. Namba, M. Nakasako
    • Organizer
      第55回生物物理学会年会
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Presentation] 細胞のコヒーレントX線回折イメージング2017

    • Author(s)
      中迫雅由
    • Organizer
      バイオイメージング学会
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Invited
  • [Book] X-ray diffraction imaging of biological cells2018

    • Author(s)
      M. Nakasako
    • Total Pages
      228
    • Publisher
      Springer
    • ISBN
      9784431566168
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Book] X-ray diffraction imaging of biological cells (Springer Ser. Optic. Sciences Vol. 210)2018

    • Author(s)
      M. Nakasako
    • Total Pages
      228
    • Publisher
      Springer
    • ISBN
      9784431566168
    • Related Report
      2017 Annual Research Report

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Published: 2017-04-28   Modified: 2019-12-27  

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