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近赤外蛍光によるマウス全身観察のためのケミカルタグ技術の開発

Publicly Offered Research

Project AreaResonance Biology for Innovative Bioimaging
Project/Area Number 18H04726
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

浅沼 大祐  東京大学, 大学院医学系研究科(医学部), 助教 (10611204)

Project Period (FY) 2018-04-01 – 2020-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2019)
Budget Amount *help
¥10,140,000 (Direct Cost: ¥7,800,000、Indirect Cost: ¥2,340,000)
Fiscal Year 2019: ¥5,070,000 (Direct Cost: ¥3,900,000、Indirect Cost: ¥1,170,000)
Fiscal Year 2018: ¥5,070,000 (Direct Cost: ¥3,900,000、Indirect Cost: ¥1,170,000)
Keywords蛍光イメージング / タンパク質タグ / 近赤外蛍光
Outline of Annual Research Achievements

近赤外蛍光は、組織透過性の高さや光の散乱の小ささ、夾雑する自家蛍光の少なさから生体イメージングへの応用に極めて有用である。本研究は、生体深部観察に適した近赤外蛍光を用いて、生体内で特異性の高い細胞標識を可能とするケミカルタグ技術を開発することを目的とする。前年度までに、720 nmの近赤外領域に蛍光極大波長を有するケミカルプローブを開発し、これをマウスモデルに応用することでケミカルタグ発現がん細胞のリンパ節転移を可視化した。今年度は、生体深部の観察にさらに適した800 nm以上の近赤外波長域で蛍光イメージングが可能なケミカルプローブの開発に取り組んだ。候補として5種類のケミカルプローブを合成して蛍光特性のin vitro評価を行ったところ、ケミカルプローブはケミカルタグタンパク質への結合に伴って4-14倍の蛍光増大を示した。マウス骨肉腫由来LM8細胞、マウス卵巣がん由来OV2944-HM-1細胞のそれぞれにレンチウイルスを用いた遺伝子導入を行った後、シングルセルクローニングによりケミカルタグを細胞膜上に安定発現する細胞株をいずれの細胞についても樹立した。ケミカルタグ発現細胞および非発現細胞の共培養系を用いて蛍光イメージングを行い、ケミカルプローブがケミカルタグ発現細胞を選択的に蛍光染色できることを確認した。続いて、生体イメージング応用のため、ケミカルプローブの可視化に適した光源およびフィルターを組み合わせた観察システムを構築した。ケミカルタグ発現がん細胞を用いて作製した腹膜播種マウスモデルにケミカルプローブを応用したところ、腹腔内に転移したがん細胞が高いコントラストで可視化された。本研究で開発したケミカルタグ技術は、がんの転移の様子の観察など、生体内の標的細胞の可視化に有用である。

Research Progress Status

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2019 Annual Research Report
  • 2018 Annual Research Report
  • Research Products

    (7 results)

All 2020 2019

All Presentation (7 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Invited: 1 results)

  • [Presentation] 近赤外領域におけるカルシウム蛍光イメージングのための新規タグツールの開発2020

    • Author(s)
      磯野有希、浅沼大祐、大久保洋平、並木繁行、廣瀬謙造
    • Organizer
      第93回日本薬理学会年会
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
  • [Presentation] Fluorophore-quencher based chemical tag technology for biological imaging2019

    • Author(s)
      Daisuke Asanuma, Shigeyuki Namiki, and Kenzo Hirose
    • Organizer
      2019 International Conference for Leading and Young Medical Scientists
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] 高精細なバイオイメージングのためのケミカルタグ技術の開発2019

    • Author(s)
      浅沼大祐
    • Organizer
      第92回日本生化学会大会
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
  • [Presentation] 近赤外蛍光in vivoイメージングのためのケミカルタグツールの開発2019

    • Author(s)
      浅沼大祐、小島佑介、岡本紘幸、並木繁行、廣瀬謙造
    • Organizer
      日本薬学会 第139年会
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
  • [Presentation] Development of a chemical tag tool for near-infrared fluorescence in vivo imaging2019

    • Author(s)
      Yusuke Kojima, Daisuke Asanuma, Hiroyuki Okamoto, Shigeyuki Namiki, Kenzo Hirose
    • Organizer
      第92回日本薬理学会年会(日本、大阪)
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] 近赤外蛍光in vivoイメージングのためのケミカルタグツールの開発2019

    • Author(s)
      小島佑介、浅沼大祐、岡本紘幸、並木繁行、廣瀬謙造
    • Organizer
      日本化学会 第99春季年会(日本、神戸)
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] 近赤外蛍光in vivoイメージングのためのケミカルタグツールの開発2019

    • Author(s)
      小島佑介、浅沼大祐、岡本紘幸、並木繁行、廣瀬謙造
    • Organizer
      日本薬学会第139年会(日本、幕張)
    • Related Report
      2018 Annual Research Report

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Published: 2018-04-23   Modified: 2021-01-27  

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