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Exploration research toward the development of new principles for membrane potential detection

Publicly Offered Research

Project AreaResonance Biology for Innovative Bioimaging
Project/Area Number 18H04731
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionJapan Advanced Institute of Science and Technology

Principal Investigator

筒井 秀和  北陸先端科学技術大学院大学, 先端科学技術研究科, 准教授 (30392038)

Project Period (FY) 2018-04-01 – 2020-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2019)
Budget Amount *help
¥8,970,000 (Direct Cost: ¥6,900,000、Indirect Cost: ¥2,070,000)
Fiscal Year 2019: ¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2018: ¥4,810,000 (Direct Cost: ¥3,700,000、Indirect Cost: ¥1,110,000)
Keywords蛍光蛋白質 / 蛍光 / 金属・溶液界面 / 蛍光タンパク質 / 金属ー溶液界面 / 細胞膜電位 / 細胞生物学 / 生物物理学
Outline of Annual Research Achievements

電場は物質としての実体はないが、生体における重要な情報伝達因子の一つである。神経や筋の活動電位、ミトコンドリア膜におけるエネルギー産生の他、膜電場は多様な細胞機能に関与することが示唆されているが、その全貌は未だ明らかとなってはいない。膜電位が果たす役割をより詳細に理解するためには、従来の電気生理的手法に加え膜電位動態の時空間可視化技術が重要である。これまでに例えば、蛍光タンパク質と膜電位依存的に構造変化を引き起こす電位センサードメインとを融合させることにより、膜電位変化を光学信号として可視化する分子ツールが作成されてきたが、その適用範囲や感度、時間特性はまだ限られており、さらなる発展が必要な状況にある。
蛍光蛋白質が金属・溶液界面において電場依存的に千倍以上のコントラスト比で蛍光強度の変調を引き起こすことを見出し、膜電位可視化をはじめとする細胞生物学的応用への可能性があると考え、その現象の記載と原理解明を目指した実験を行った。その結果、1)変調時に蛍光波長の有意な変化は検出されないこと、2)蛍光蛋白質の種類によって、電圧依存性や時間特性といった応答の細部が異なること、3)局所pHの変化のみでは説明できないこと、4)発色団内のチロシン由来水酸基のプロトン化状態の遷移は本現象に必須ではないこと、5)蛍光蛋白質を別の蛋白質層を介して間接的に固定化しても類似の現象が観察されること、などを見出した。共鳴エネルギー移動効率が電場依存的に変化している可能性、金属-蛋白質間の電化移動が重要な役割を果たす可能性を想定している。今後、さらに原理の詳細を理解することにより、本研究で見出された蛍光蛋白質の金属・溶液界面における電圧依存的な蛍光変調現象は、細胞生物学的応用のみならず、例えば分子素子としての応用など、将来的に広い分野に波及する可能性を持つ。

Research Progress Status

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2019 Annual Research Report
  • 2018 Annual Research Report
  • Research Products

    (11 results)

All 2020 2019 2018

All Journal Article (2 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 2 results) Presentation (9 results) (of which Int'l Joint Research: 5 results,  Invited: 1 results)

  • [Journal Article] Electric-field control of fluorescence protein emissions at the metal-solution interface2019

    • Author(s)
      Farha Trisha Diba、Hama Kohsuke、Imayasu Mieko、Hiratsuka Yuichi、Miyawaki Atsushi、Tsutsui Hidekazu
    • Journal Title

      Applied Physics Express

      Volume: 12 Issue: 6 Pages: 067001-067001

    • DOI

      10.7567/1882-0786/ab1ff6

    • NAID

      210000155958

    • Related Report
      2019 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Tracking the sarcoplasmic reticulum membrane voltage in muscle with a FRET biosensor2018

    • Author(s)
      Sanchez Colline、Berthier Christine、Allard Bruno、Perrot Jimmy、Bouvard Cl?ment、Tsutsui Hidekazu、Okamura Yasushi、Jacquemond Vincent
    • Journal Title

      The Journal of General Physiology

      Volume: 150 Issue: 8 Pages: 1163-1177

    • DOI

      10.1085/jgp.201812035

    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Presentation] Toward molecule-specific formation of neuron-microelectrode junctions2020

    • Author(s)
      SamYoung Kim, Hamid Sm Ahasanul, Mieko Imayasu, Tomoyuki Yoshida, Hidekazu Tsutsui
    • Organizer
      第97回生理学会
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
  • [Presentation] Establishment of a method measuring membrane potential in phagosomes2020

    • Author(s)
      Yoshifumi Okochi, Hidekazu Tsutsui, Yasushi Okamura
    • Organizer
      第97回生理学会
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
  • [Presentation] Electric-field control of fluorescence protein emissions at the metal-solution interface2019

    • Author(s)
      Trisha D Farha, Kim Samyoung, Mieko Imayasu, Atsushi Miyawaki, Hidekazu Tsutsui
    • Organizer
      RBIS international symposium, Kobe
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Artificial photoconvertible proteins: engineering, mechanism and in vivo crystallization2018

    • Author(s)
      Hidekazu Tsutsui
    • Organizer
      ivMX 2018, Synchrotron SOLEIL, France
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Glutamate-binding protein integrated into single-walled carbon nanotube field-effect transistor for ultrasensitive glutamate detection2018

    • Author(s)
      N.T. Tung, T.D. Farha, H. Tsutsui, T.T.N. Lien, Y. Ohno, K. Maehashi, K. Matsumoto, P.T. Tue, Y. Takamura,
    • Organizer
      28th Anniversary World Congress on Biosensors, No. P1.188, Miami, USA, June 12-15, 2018
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Development of glutamate biosensor based on the integration of network SWCNT-FET and glutamate-binding protein2018

    • Author(s)
      N.T. Tung, T.D. Farha, H. Tsutsui, T.T.N. Lien, Y. Ohno, K. Maehashi, K. Matsumoto, P.T. Tue, Y. Takamura,
    • Organizer
      u-TAS 2018, Kaohsiung, Taiwan, Nov 11-15, 2018
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Study on Glutamate detection using Glutamate-binding protein modified network single-walled carbon nanotube field-effect transistor2018

    • Author(s)
      Nguyen Thanh Tung , Trisha Diba Farha, Hidekazu Tsutsui, Truong Thi Ngoc Lien, Yasuhide Ohno, Kenzo Maehashi, Kazuhiko Matsumoto, Phan Trong Tue, Yuzuru Takamura,
    • Organizer
      CHEMINAS37, No. 3P17, AIST Tsukuba Central, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology, Ibaraki, Japan, May 21-22, 2018
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Micro-display devices based on fluorescence and bioluminescence proteins.2018

    • Author(s)
      Kohske Hama, Trisha D. Farha, Mieko Imayasu, Ken-ichi Shinohara, Yuichi Hiratsuka, Atsushi Miyawaki, Hidekazu Tsutsui
    • Organizer
      第56回 生物物理学会年会
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] Toward understanding of membrane potential in phagosomal membrane2018

    • Author(s)
      Yoshifumi Okochi, Hidekazu Tsutsui, Yasushi Okamura
    • Organizer
      NIPSシンポジウム, Okazaki
    • Related Report
      2018 Annual Research Report

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Published: 2018-04-23   Modified: 2024-12-25  

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