原虫共生ウイルスの遺伝子発現制御による共生機構の解明
Publicly Offered Research
| Project Area | Neo-virology: the raison d'etre of viruses |
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| Project/Area Number |
19H04842
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Review Section |
Biological Sciences
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
村越 ふみ 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (20759906)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2021-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2020)
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| Budget Amount *help |
¥6,500,000 (Direct Cost: ¥5,000,000、Indirect Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2020: ¥3,250,000 (Direct Cost: ¥2,500,000、Indirect Cost: ¥750,000)
Fiscal Year 2019: ¥3,250,000 (Direct Cost: ¥2,500,000、Indirect Cost: ¥750,000)
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| Keywords | リーシュマニア / 共生ウイルス / マウス / 原虫 / dsRNAウイルス |
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| Outline of Research at the Start |
原虫に共生しているウイルスが、原虫やその宿主（ヒト）に対していかなる役割を持つのかを明らかにするため、原虫およびその宿主（ヒトやマウス）の遺伝子発現に与える影響を調べる。そのため、まずはRNA依存的RNAポリメラーゼ阻害薬(RdRpi)を用いることによって、リーシュマニア共生ウイルス(LRV2)を持つLeishmania majorから、共生ウイルスを持たないリーシュマニアを作出・クローン株を得る。その後、原虫共生ウイルスの有無のみ異なる原虫およびその宿主のトランスクリプトーム解析を行い、共生ウイルスが存在することによって発現が変化している遺伝子を網羅的に探索する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
リーシュマニア原虫は、サシチョウバエによって媒介され、ヒトにおいて粘膜破壊や肝脾腫、皮膚の潰瘍を引き起こし、時に致死的となるため、世界的に問題となっている。
申請者は、皮膚リーシュマニア原虫Leishmania major (L. major)に2本鎖RNA (dsRNA) ウイルスが共生していることを、次世代シーケンサーを用いて明らかにした。RNA依存的RNAポリメラーゼ阻害薬(RdRpi)を用いることによって、リーシュマニア共生ウイルス(LRV2)のコピー数が異なるL. majorを作出し、これをマウスに感染させたところ、共生ウイルスのコピー数が多いL. majorを接種した区において、マウスへの病原性が上がっていた。
そこで、同様の方法を用いて共生ウイルスを持つL. majorから、共生ウイルスを持たないL. majorのクローン株を作出した。つまり、遺伝的背景が同一で、共生ウイルスの有無のみが異なるL. majorの作成に成功した。これをマウスに接種したところ、共生ウイルスを持たないL. majorのマウスに対する病原性の低下が確認された。しかし、クローン間でばらつきがあったため、より多くのクローン株を作成し、マウスに対する病原性を調べた。
その結果、共生ウイルスを持つL. majorを接種した区は、共生ウイルスを持たないL. majorを接種した区と比較して、病変が生じる日数が早まり、病変の大きさも大きいことが示された。従って、L. majorにおいて共生ウイルスが原虫の宿主への病原性に関わっていることが示された。
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| Research Progress Status |
令和2年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和2年度が最終年度であるため、記入しない。
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Report
(2 results)
Research Products
(8 results)
