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拡張viromeデータと長鎖シーケンサーを用いたファージと宿主のビッグデータ解析

Publicly Offered Research

Project AreaNeo-virology: the raison d'etre of viruses
Project/Area Number 19H04846
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)

Allocation TypeSingle-year Grants
Review Section Biological Sciences
Research InstitutionNational Institute of Infectious Diseases

Principal Investigator

矢原 耕史  国立感染症研究所, 薬剤耐性研究センター, 室長 (70542356)

Project Period (FY) 2019-04-01 – 2021-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2020)
Budget Amount *help
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2020: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
Fiscal Year 2019: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
Keywordsファージ / ヴァイローム / ロングリード / メタゲノム / 細菌 / ゲノム / 口腔 / ナノポア / 組換え
Outline of Research at the Start

本研究ではまず、適応進化の原動力であるゲノムの組換えに注目し、地球上のウイルス叢の総体(virome)の最新データセットの解析によって、組換えの痕跡はどのような系統でどれだけ広く見られるのか、そして特に、自然選択を受け、組換えが頻発して見える系統や遺伝子は存在するのか、を探る。次に、ウイルスと宿主細菌の関係を探るモデル系として、両者が最も高密度に存在する環境の1つである口腔に注目し、最新の大型長鎖シーケンサーPromethIONとIllumina HiSeqで唾液をdeepにメタゲノム解読し、両者のハイブリッドアセンブリの効果でウイルスと細菌の世界の様相がどう変化するのかを明らかにする

Outline of Annual Research Achievements

大型長鎖シーケンサー(PromethION)とIllumina Hiseqの両方で初めてヒト唾液由来DNAをショットガンメタゲノム解読したデータ(1サンプル30Gb以上で、ヒト由来DNAの混入率は1%未満)を解析することで、数百のファージを検出した。特にプロファージについて、長鎖リードのデータによってその全長が明らかになり、ホストゲノム上での位置とその周辺構造およびその系統分類が明らかになることを示した。存在量が特に多いファージ・プロファージの中には、口腔連鎖球菌に感染するファージのクラスターや、200kbを超えるジャンボファージが含まれることも明らかになった。それらの多くは薬剤耐性遺伝子の遠縁ホモログをコードしていることや、口腔ファージの遺伝子総数の中でコア遺伝子は僅か0.3%である一方、個人特有のシングルトン遺伝子が86.4%を占めることも明らかになった。さらに、ヒト唾液中のファージが宿主細菌のCRISPRの免疫系を回避していることの示唆や、ヒト由来DNAの混入率が1%未満となる理由まで明らかにすることが出来た(Yahara et al, Nature Communications, 2021)。これと並行して、機序不明だった口腔疾患に注目し、唾液由来DNAのショットガンメタゲノムデータを患者群と健常者群で比較する研究も行い、患者群に有意に高頻度に存在する微生物(Actinomyces)とその遺伝子を同定することも出来た(Yahara et al, PLOS One, 2020)。

Research Progress Status

令和2年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和2年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2020 Annual Research Report
  • 2019 Annual Research Report
  • Research Products

    (11 results)

All 2021 2020 2019 Other

All Int'l Joint Research (2 results) Journal Article (3 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 3 results,  Open Access: 3 results) Presentation (6 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Invited: 1 results)

  • [Int'l Joint Research] リスボン大学(ポルトガル)

    • Related Report
      2019 Annual Research Report
  • [Int'l Joint Research] ボルドー大学(フランス)

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      2019 Annual Research Report
  • [Journal Article] Long-read metagenomics using PromethION uncovers oral bacteriophages and their interaction with host bacteria2021

    • Author(s)
      Yahara Koji、Suzuki Masato、Hirabayashi Aki、Suda Wataru、Hattori Masahira、Suzuki Yutaka、Okazaki Yusuke
    • Journal Title

      Nature Communications

      Volume: 12 Issue: 1 Pages: 1-12

    • DOI

      10.1038/s41467-020-20199-9

    • Related Report
      2020 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Shotgun metagenome sequencing identification of a set of genes encoded by Actinomyces associated with medication-related osteonecrosis of the jaw2020

    • Author(s)
      Yahara Hiroko、Hiraki Akimitsu、Maruoka Yutaka、Hirabayashi Aki、Suzuki Masato、Yahara Koji
    • Journal Title

      PLOS ONE

      Volume: 15 Issue: 11 Pages: e0241676-e0241676

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0241676

    • Related Report
      2020 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Analysis of genetic recombination and the pan-genome of a highly recombinogenic bacteriophage species2019

    • Author(s)
      Yahara Koji、Lehours Philippe、Vale Filipa F.
    • Journal Title

      Microbial Genomics

      Volume: 5 Issue: 8 Pages: 1-9

    • DOI

      10.1099/mgen.0.000282

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      2019 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Presentation] Long-read metagenomics using PromethION uncovers oral bacteriophages and their interaction with host bacteria2021

    • Author(s)
      Koji Yahara, Masato Suzuki, Aki Hirabayashi, Wataru Suda, Masahira Hattori, Yutaka Suzuki, Yusuke Okazaki
    • Organizer
      ゲノム微生物学会年会
    • Related Report
      2020 Annual Research Report
  • [Presentation] 唾液のメタゲノム解読と 薬剤耐性菌ゲノムサーベイランスに関する最近の話題2021

    • Author(s)
      矢原耕史
    • Organizer
      東海大学シンポジウム「感染症診断と治療におけるゲノム解析」
    • Related Report
      2020 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] Shotgun metagenome sequencing identification of a set of genes encoded by Actinomyces associated with medication-related osteonecrosis of the jaw2020

    • Author(s)
      Hiroko Yahara, Akimitsu Hiraki, Yutaka Maruoka, Aki Hirabayashi, Masato Suzuki, Koji Yahara
    • Organizer
      細菌学会年会
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      2020 Annual Research Report
  • [Presentation] ファージと宿主菌のビッグデータ解析 - Earth's viromeデータの拡張とPromethIONの活用2020

    • Author(s)
      Koji Yahara, Philippe Lehours, Filipa F Vale, 平林亜希, 鈴木仁人, 鈴木穣
    • Organizer
      ゲノム微生物学会
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      2019 Annual Research Report
  • [Presentation] Population and meta genomic studies of bacteriophages and host bacteria utilizing Earth's virome and PromethION2019

    • Author(s)
      Koji Yahara
    • Organizer
      ウイルス情報解析国際ワークショップ(with Dr. Mart Krupovic and Dr. Kira Makarova)
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      2019 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Population and meta genomic studies of bacteriophages and host bacteria utilizing Earth's virome and PromethION2019

    • Author(s)
      Koji Yahara
    • Organizer
      ネオウイルス学国際ワークショップ(with Dr. Matthew Sullivan)
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research

URL: 

Published: 2019-04-18   Modified: 2021-12-27  

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