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De novo formation and conversion of apical meristem stem cell niche during shoot regeration and their regulatory mechanisms

Publicly Offered Research

Project AreaPrinciples of pluripotent stem cells underlying plant vitality
Project/Area Number 20H04881
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)

Allocation TypeSingle-year Grants
Review Section Biological Sciences
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

杉山 宗隆  東京大学, 大学院理学系研究科(理学部), 教授 (50202130)

Project Period (FY) 2020-04-01 – 2022-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2021)
Budget Amount *help
¥10,920,000 (Direct Cost: ¥8,400,000、Indirect Cost: ¥2,520,000)
Fiscal Year 2021: ¥5,460,000 (Direct Cost: ¥4,200,000、Indirect Cost: ¥1,260,000)
Fiscal Year 2020: ¥5,460,000 (Direct Cost: ¥4,200,000、Indirect Cost: ¥1,260,000)
Keywordsシロイヌナズナ / トレニア / 幹細胞 / シュート頂分裂組織 / シュート再生 / 内生IAA / TBP関連因子 / トランスクリプトーム / 頂端分裂組織 / 幹細胞ニッチ
Outline of Research at the Start

植物の器官再生は、頂端分裂組織の幹細胞ニッチの新生や転換を伴う、ダイナミックな現象である。高濃度のオーキシンを投与してカルスを誘導し、その後に高濃度のサイトカイニンを投与して不定芽を誘導する、2段階式のシュート再生では、根端分裂組織タイプの幹細胞ニッチがまず生じ、これがシュート頂分裂組織タイプに転換して、不定芽の形成に至る。本研究では、内生IAAとTBP関連因子のBTAFを糸口にこの過程の分子ネットワークを追究し、併せてカルス段階を経ない直接シュート再生との比較分析を行って、シュート再生における幹細胞の動態と制御機構を解き明かしていく。

Outline of Annual Research Achievements

シュート再生過程における頂端分裂組織幹細胞ニッチの新生と転換のメカニズムに関し、高濃度の2,4-Dをオーキシンとして含むカルス誘導培地(CIM)でシロイヌナズナの胚軸断片を培養した後、高濃度の2iPをサイトカイニンとして含むシュート誘導培地(SIM)に移植して不定芽のシュート頂分裂組織(SAM)を形成させる、2段階式のシュート再生系において、内生IAAに着目した解析とTBP関連因子のBTAF1に着目した解析を行うとともに、トレニアの茎断片をサイトカイニンのBAPを含む培地で培養し、表皮から不定芽SAMを誘導する、直接シュート再生系を用いて、細胞学的解析とトランスクリプトーム解析を行った。シロイヌナズナの2段階シュート再生系の解析では、CIM培養時のIAA生合成阻害剤・極性輸送阻害剤処理によるシュート再生能昂進について、内生IAAの攪乱が引き起こすオーキシン応答の均一化と増大、根端分裂組織(RAM)関連遺伝子の発現レベルの上昇と発現域の拡大が、新生RAM型幹細胞ニッチの多能状態の保持と密接に関連していることが示された。また、BTAF1の温度感受性変異体rgd3から単離した抑圧変異体6系統について、全ゲノムシークエンスを行い、抑圧表現型と連鎖している変異を特定した。これにより、SIM移植後に起きるRAM型からSAM型への幹細胞ニッチの転換を、BTAF1分子ネットワークから遺伝学的に追究する準備が整った。トレニアの直接シュート再生系では、昨年度までの解析により、培養開始直後に遺伝子発現プロフィールの大規模な変化が起き、その後サイトカイニンに依存したrRNA生合成関連遺伝子の発現や核小体の著しい発達が起きることなどがわかっていた。本年度はこれらに関し新たにいくつかの解析を試み、個々の細胞における遺伝子発現の変動や、TOR経路の関与について、予備的な知見を得た。

Research Progress Status

令和3年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和3年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2021 Annual Research Report
  • 2020 Annual Research Report
  • Research Products

    (25 results)

All 2022 2021 2020 Other

All Int'l Joint Research (2 results) Journal Article (5 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 5 results,  Open Access: 3 results) Presentation (16 results) Book (1 results) Remarks (1 results)

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    • Author(s)
      Iwai Ohbayashi, Yuki Sakamoto, Hitomi Kuwae, Hiroyuki Kasahara, Munetaka Sugiyama
    • Journal Title

      Plant Biotechnology

      Volume: 39 Issue: 1 Pages: 43-50

    • DOI

      10.5511/plantbiotechnology.21.1225a

    • ISSN
      1342-4580, 1347-6114
    • Year and Date
      2022-03-25
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      Hatsune Morinaka, Akihito Mamiya, Hiroaki Tamaki, Akitoshi Iwamoto, Takamasa Suzuki, Ayako Kawamura, Momoko Ikeuchi, Akira Iwase, Tetsuya Higashiyama, Keiko Sugimoto, Munetaka Sugiyama
    • Journal Title

      Plant & Cell Physiology

      Volume: 62 Issue: 8 Pages: 1335-1354

    • DOI

      10.1093/pcp/pcab101

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      Takaaki Yonekura, Munetaka Sugiyama
    • Journal Title

      Journal of Plant Research

      Volume: 134 Issue: 3 Pages: 417-430

    • DOI

      10.1007/s10265-021-01308-1

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      米倉崇晃,杉山宗隆
    • Journal Title

      PLANT MORPHOLOGY

      Volume: 33 Issue: 1 Pages: 59-65

    • DOI

      10.5685/plmorphol.33.59

    • ISSN
      0918-9726, 1884-4154
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      Otsuka Kurataka、Mamiya Akihito、Konishi Mineko、Nozaki Mamoru、Kinoshita Atsuko、Tamaki Hiroaki、Arita Masaki、Saito Masato、Yamamoto Kayoko、Hachiya Takushi、Noguchi Ko、Ueda Takashi、Yagi Yusuke、Kobayashi Takehito、Nakamura Takahiro、Sato Yasushi、Hirayama Takashi、Sugiyama Munetaka
    • Journal Title

      eLife

      Volume: 10

    • DOI

      10.7554/elife.61611

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  • [Presentation] トレニアの直接シュート再生過程における表皮細胞リプログラミングのトランスクリプトーム解析2021

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      第62回植物生理学会年会
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      第62回植物生理学会年会
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      菊池 涼夏,杉山 宗隆,岩元 明敏
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      第62回植物生理学会年会
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      森中 初音,間宮 章仁,玉置 裕章,鈴木 孝征,池内 桃子,岩瀬 哲,杉本 慶子,東山 哲也,杉山 宗隆
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      日本植物学会第84回大会
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      安藤 沙友里,岩川 秀和,小島 晶子,杉山 宗隆,町田 泰則,町田 千代子
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      大林 祝,坂本 優希,杉山 宗隆
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      日本植物学会第84回大会
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  • [Book] 遺伝学の百科事典2022

    • Author(s)
      日本遺伝学会
    • Total Pages
      690
    • Publisher
      丸善出版
    • ISBN
      9784621306604
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  • [Remarks] 生体制御研究室 杉山G

    • URL

      http://www.bs.s.u-tokyo.ac.jp/~seigyo/sugi/index.html

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URL: 

Published: 2020-04-28   Modified: 2022-12-28  

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