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クロマチン構造の核内観察

Publicly Offered Research

Project AreaChromatin potential for gene regulation
Project/Area Number 21H00246
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)

Allocation TypeSingle-year Grants
Review Section Biological Sciences
Research InstitutionTokyo Institute of Technology

Principal Investigator

藤芳 暁  東京工業大学, 理学院, 助教 (70371705)

Project Period (FY) 2021-04-01 – 2023-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help
¥9,360,000 (Direct Cost: ¥7,200,000、Indirect Cost: ¥2,160,000)
Fiscal Year 2022: ¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2021: ¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Keywordsクロマチン / クライオ蛍光顕微鏡 / 1分子 / 1分子観察 / クライオ顕微鏡 / 蛍光 / 超流動ヘリウム / ナノスコピー
Outline of Research at the Start

物理学者・生物学者・化学者の三者協力により、前人未踏の細胞内の分子イメージングを実証し、クロマチンの機能を分子レベルで理解するための新しい方法論を確立することを研究目的とする。さらに、同一の細胞株に対して、ライブイメージングをおこなうことで、超流動ヘリウム蛍光顕微鏡で観察されたナノレベルの空間情報がクロマチン動態にどのように関係しているかについて研究する。我々はすでに、前回の公募研究において、細胞外であれば光による分子イメージングに成功しており、これを利用して研究をおこなう。

Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的は、クロマチン動態を分子レベルで理解するための新しい方法を開発することである。このため、超流動ヘリウム蛍光顕微鏡を用いて、前人未踏の細胞内の分子イメージングを実証し、同一の細胞株のライブイメージングによりクロマチン動態を観察する。二つの方法で得られた分子イメージとライブイメージから、クロマチンの機能について研究することを目的として、研究をおこなった。
細胞内の分子イメージングには成功しなかったものの、今年度は大きな成果があった。我々が開発してきたクライオ蛍光顕微鏡では、ナノレベルの安定性を得るために対物レンズと試料を同一の試料ホルダーに設置し、共に超流動ヘリウム中に浸すというデザインを用いている。このデザインを用いることで、顕微鏡全体の安定性として10時間で数nmに抑えることに成功している。ところが、この場合、試料ステージを空間的に走査することが必須であるが、安定性と走査範囲に反比例の関係があり、安定性をナノレベルに設定すると、走査範囲が0.1 mm程度に制限されてしまうのが現状であった。このため、不均一性が高く、サイズが大きな試料である生体系を観察するのには大きな障害となっていた。そこで、本年度は、試料ステージの安定化に用いていた位置センサーを静電容量方式から光干渉計方式に変更することで、オングストロームの安定性を持ちながら、ミリメータの走査範囲を確保することに成功した。これは、クロマチンだけでなく、生体系一般に使える技術となった。

Research Progress Status

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2022 Annual Research Report
  • 2021 Annual Research Report
  • Research Products

    (10 results)

All 2022 2021

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (9 results) (of which Invited: 3 results)

  • [Journal Article] Superfluid helium nanoscope insert with millimeter working range2022

    • Author(s)
      Kamiya Naoki、Kuramoto Kazuki、Takishima Kento、Yumoto Tatsuya、Oda Haruka、Shimi Takeshi、Kimura Hiroshi、Matsushita Michio、Fujiyoshi Satoru
    • Journal Title

      Review of Scientific Instruments

      Volume: 93 Issue: 10 Pages: 103703-103703

    • DOI

      10.1063/5.0107395

    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] 細胞内の1分子を三次元でナノレベル分解能で観察できるクライオ三次元ナノスコピーの開発2022

    • Author(s)
      成瀬寛太, 松田剛, 溝内雄太, 志見剛, 木村宏, 中田栄司, 森井孝, 松下道雄, 藤芳暁
    • Organizer
      日本生物物理学会年会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] 生体試料の3次元イメージングのための可変浸レンズを用いた光シート蛍光顕微鏡の開発2022

    • Author(s)
      湯本達也, 志見剛, 木村宏, 松下道雄, 藤芳暁
    • Organizer
      分子生物学会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 細胞内1分子ナノスコピーのための近赤外蛍光標識技術の開発2022

    • Author(s)
      藏本和輝, 武藤慶, 宮崎龍也, 山口潤一郎, 成瀬寛太, 神谷直輝,荒巻秀和, 松下道雄, 小田春佳, 志見剛, 木村宏, 藤芳暁
    • Organizer
      日本生物物理学会年会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] ナノレベルの精度を持つ光電子相関顕微鏡の要素開発:無冷媒クライオスタットを用いたサンプルホルダーのサブミリケルビン安定化2022

    • Author(s)
      賴田拓真, 松下道雄, 藤芳暁
    • Organizer
      日本生物物理学会年会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] ナノレベルの クライオ1分子イメージング2022

    • Author(s)
      藤芳 暁
    • Organizer
      第15回エピジェネティクス研究会年会 エピジェネティクス研究における技術開発
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] 蛍光顕微鏡によって クロマチン構造を可視化できるか2022

    • Author(s)
      藤芳 暁
    • Organizer
      日本顕微鏡学会 第78回学術講演会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] 近赤外蛍光プローブを利用した三次元ナノスコピー2021

    • Author(s)
      成瀬寛太, 武藤慶, 宮崎龍也, 山口潤一郎, 松田剛, 溝内雄太, 志見剛, 木村宏, 松下道雄, 藤芳暁
    • Organizer
      日本物理学会2021年秋季大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] 波動光学による光シート顕微鏡の照射系に関する研究2021

    • Author(s)
      湯本達也, 藤芳暁, 松下道雄
    • Organizer
      日本物理学会2021年秋季大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] 温度4 Kにおける光干渉計による試料ステージの安定化についての研究2021

    • Author(s)
      神谷直輝, 滝島研人, 藤芳暁, 松下道雄
    • Organizer
      日本物理学会2021年秋季大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report

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Published: 2021-04-28   Modified: 2023-12-25  

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