Publicly Offered Research
Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
我々は、動物細胞内で働く脱ユビキチン化酵素の一つUSP8に着目して研究を行っている。これまでに、USP8は増殖因子受容体のエンドサイトーシスを制御することを明らかにしてきた。また、USP8がクッシング病の原因遺伝子であることも発見してきた。クッシング病は下垂体から副腎皮質刺激ホルモン（ACTH）が過剰に分泌されて起こる難病だが、詳しい発症分子機構は不明ある。本研究では、USP8の活性の検出や操作を可能とする化学的技術（ケモテクノロジー）を開発・活用し、野生型USP8のエンドサイトーシスにおける作用機構と変異型USP8のクッシング病発症における作用機構を詳細に明らかにすることを目指している。
新たなケミカルツールの開発として、領域内の共同研究によりUSP8活性の簡便な測定法を開発し、阻害剤を探索した。ユビキチンを豊富に含む細胞内高粘度領域を可視化するため、粘度応答性化学プローブの開発を行い、高粘度酸性オルガネラの可視化に成功した。この他に、USP8の自己阻害メカニズムの構造解析に必要なUSP8タンパク質の配列を検討し、精製を進めた。開発ツールを活用して野生型USP8の作用機構を検討し、細胞分裂期にUSP8の自己阻害が解除され、これによりエンドソーム動態が制御されることがわかってきた。また、自己阻害の解除機構として、ある種のエンドソームタンパク質がUSP8と相互作用することによってWW-likeドメインがUSPドメインに結合しにくくなることがわかった。USP8のWW-likeドメインに変異もつクッシング病患者が見出されたので解析を行ない、変異がWW-likeドメインの自己阻害能を失わせることがわかった。これは、USP8の自己阻害の異常がクッシング病の主な背景分子機構であるという我々の仮説を強く支持する成果である。USP8に関して積み上げた知見に基づき、関連課題の解決にも取り組んだ。一部のクッシング病患者ではUSP48に活性化変異が生じている。USP48の活性制御を調べ、C末端配列が活性化に必要であること、疾患変異によってC末端非依存的に活性化することがわかった。また、USP8以外の脱ユビキチン化酵素にも自己阻害機構があるか検討し、エンドソームに存在する脱ユビキチン化酵素であるSTAMBPとSTAMBPL1のMITドメインが酵素ドメインに結合することにより自己阻害が生じていることを見つけた。さらに、STAMBPL1はアポトーシス時に限定分解をうけて自己阻害が解除されること、その結果高い酵素活性を有する断片がアポトーシスを促進することを見出した。
令和4年度が最終年度であるため、記入しない。
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All Int'l Joint Research (6 results) Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results, Open Access: 3 results) Presentation (11 results) (of which Int'l Joint Research: 4 results, Invited: 3 results) Remarks (2 results)
Analytical Chemistry
Volume: 95 Issue: 12 Pages: 5196-5204
10.1021/acs.analchem.2c04133
Communications Biology
Volume: 4 Issue: 1 Pages: 1272-1272
10.1038/s42003-021-02802-x
Cell
Volume: 184 Issue: 14 Pages: 3812-3828
10.1016/j.cell.2021.06.004
https://komada-lab.jimdofree.com/
https://www.titech.ac.jp/english/news/2021/062478
