Publicly Offered Research
Grant-in-Aid for Transformative Research Areas (A)
授乳時において、母親の抗体は胎盤や母乳を介して子の血液中に移送され、新生児の免疫力を高める働きをしていると考えられている。我々が母親の抗体が子に運ばれない遺伝子改変マウスを作製したところ、大脳の抑制性シナプスの減少、ニューロンの形態変化、大脳全体の細胞密度の増加などが見られた。詳細な解剖学的解析を行う他、RNAシークエンスや行動解析を行い、母親の抗体からシグナルを受けたミクログリア細胞の脳発達への影響を明らかにしたい。我々は本研究により母親の抗体に反応した未成熟ミクログリア細胞の変化とその働きを明らかにする。
我々は免疫組織化学染色にて検討を行ったところ、P4.5～P8.5の脳梁、小脳白質部におけるミクログリア細胞に、IgGへの結合が見られた。一方、海馬、中脳、延髄におけるミクログリア細胞にはIgGの結合が殆ど見られなかった。Flow Cytometryにより、ミクログリアに発現しているIgG受容体を解析したところ、CD64の高い発現が見られ、CD16およびCD32の発現も見られた。我々はミクログリア初代培養を用い、IgGの添加の有無による遺伝子発現変化を、RNA-Seqにより網羅的に解析した。その結果、IgG添加群でType Iインターフェロン関連遺伝子群の上昇が見られた。Type IインターフェロンはStat1のリン酸化により、各種遺伝子の発現を誘導する。IgGによりStat1のリン酸化を解析したところ、濃度依存的にStat1をリン酸化していることが分かった。母親のIgGは胎児期においては胎盤、生後は小腸から吸収される母乳にて子に移行する。我々はCRSIPR/Cas9システムを用い、C57BL/6J マウスでFcRnが全身で欠失したKOマウスを作製した。野生型とFcRn KOマウス間で体重や脳重量において有意差は見られなかった。FcRn KOマウスの脳ではミクログリアへのIgGの結合は消失していた。大脳におけるミクログリア細胞の密度を測定したところ、P8.5のFcRn KOにおいて有意に減少していた。また抑制性ニューロンの密度に関しては、calbindin陽性細胞、parvalbumin陽性細胞共にP21のFcRn KOマウスの大脳で有意に減少していた。オリゴデンドロサイトに関しては、MBP陽性細胞がP6.5の脳梁で有意に減少していた。また、網羅的行動解析も行った。その結果、FcRn KOマウスは野生型マウスに比べ、社会的相互作用の時間が上昇していることが明らかになった。
令和4年度が最終年度であるため、記入しない。
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All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results, Open Access: 3 results) Presentation (8 results) (of which Invited: 3 results)
Journal of Neuroinflammation
Volume: 21(1) Issue: 1 Pages: 1-20
10.1186/s12974-024-03100-z
Volume: 20 Issue: 1 Pages: 1-13
10.1186/s12974-023-02694-0
Frontiers in Molecular Biosciences
Volume: 9 Pages: 1-18
10.3389/fmolb.2022.1040237
