Publicly Offered Research
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
I.精子幹細胞の動態が精子形成のクローナルな変動に及ぼす影響の解析野生型B6マウスの精巣細胞を酵素処理にて遊離し、in vitroにてVenus発現レンチウイルスに感染させ、Wマウスの精細管内に移植した。6週間後から2-3匹の野生型メスマウスと交配させたところ、5匹のレシピエントから産仔が作成された。現在生まれた仔のゲノムをサンプリング中である。複数の酵素にて切断の後、Venusプローブにてサザンブロッティングを行う。II.精子幹細胞の精子形成への寄与にCDKIが及ぼす作用の解析p21,p27などのCDKIをレンチウイルスによる発現ベクターを精子幹細胞培養株(Germline Stem:GS細胞)に導入し、強制発現させたGS細胞を樹立した。またp21ノックアウトマウスおよびp27ノックアウトマウスをICRにBackcrossした後、ホモ個体の精巣からGS細胞を樹立した。III.精子幹細胞の制御におけるライセンシング因子の阻害因子Gemininの関与の解明1)GemininをレンチウイルスベクターによりGS細胞に導入したところ増殖には影響がなかった。フローサイトメトリーにて精子幹細胞マーカーの発現に変化は無かった。2)Gemininのconditional KOマウスをR26Rマウスと交配してマーキングし、精巣細胞を採取しアデノウイルスによりCre recombinaseを導入した後、精巣内移植した。3)Gemininのconditional KOマウスをDBA/2マウスと交配させ、F1個体からGS細胞を樹立した。試験管内でアデノウイルスによりCreを導入し、Geminin欠損GS細胞の樹立中である。
All 2011 2010
All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (5 results) Book (1 results)
Biol.Reprod.
Volume: (In press)
J.Reprod.Dev.
Volume: 84 Pages: 97-105
Biochem.Biophys.Res.Commun.
Volume: 400 Pages: 27-33
Methods Enzymol.
Volume: 477 Pages: 17-36
