Publicly Offered Research
Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
これまでに殆ど明らかにされていない霊長類の胎盤の起源を探るために、 非ヒト霊長類の胎盤の起源を、ライブイメージングおよび細胞標識実験によって検証することと、非ヒト霊長類の内部細胞塊の動態を制御する分子基盤を解明することを目標として研究を実施する。
1. 非ヒト霊長類の胎盤の起源を、ライブイメージングおよび細胞標識実験によって検証するこれまでに我々は、非ヒト霊長類であるカニクイザルの胎盤の発生起源を明らかにする過程で、カニクイザルの内部細胞塊に着目した。カニクイザル受精卵にGFPおよびtdTomato mRNAを注入し、拡張胚盤胞まで体外培養する過程で、ライトシート顕微鏡によりライブイメージングを実施した。結果として、内部細胞塊の細胞の動態を可視化することに部分的に成功した。一方、カニクイザル胚盤胞のTE（栄養膜）層とICM（内部細胞塊）それぞれの胎盤や胎仔への貢献を実験的に検証するため、レンチウイルスを２段階で感染させることで、TE層とICMを個別に遺伝子標識する実験系を用いた。具体的には、受精卵の囲卵腔にGFPレンチウイルスを注入して全ての細胞がGFPで標識された胚盤胞を発生させる。その後、先行研究に従って透明体を除去し、Kusabira-OrangeレンチウイルスによりTE層のみ標識した。次に、この２色に標識されたカニクイザル胚盤胞をカニクイザル仮親の卵管に戻し、実際の発生段階における胎盤および胎仔組織への寄与を評価したところ、２胚得ることができた。現在単一細胞RNA-seq解析や免疫染色法による詳細な解析を実施している。
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
内部細胞塊の動態をライブイメージングにより可視化することに成功している。また、内部細胞塊と栄養外胚葉を個別に標識した胚の解析に到達している
内部細胞塊の動態を制御する遺伝子ネットワークを明らかにしていく
