初期発生における能動的DNA脱メチル化の制御機構の解明

• Project Area: The germline: its developmental cycle and epigenome network
• Project/Area Number: 23013016
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: Biological Sciences
• Research Institution: Nagahama Institute of Bio-Science and Technology
• Principal Investigator: 中村 肇伸 長浜バイオ大学, バイオサイエンス学部, 講師 (80403202)
• Project Period (FY): 2011 – 2012
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2012)
• Budget Amount: ¥6,200,000 (Direct Cost: ¥6,200,000); Fiscal Year 2012: ¥3,100,000 (Direct Cost: ¥3,100,000); Fiscal Year 2011: ¥3,100,000 (Direct Cost: ¥3,100,000)
• Keywords: 能動的DNA脱メチル化 / クロマチン

Research Abstract

最近、我々を含む複数のグループにより、Tet3による5-メチルシトシン(5-methylcytosine;5mC)から5-ヒドロキシメチルシトシン(5-hydroxylmethylcytosine;5hmC)への変換が能動的DNA脱メチル化に関与することが明らかにされた。しかし、能動的DNA脱メチル化には、5hmCを介さない経路が存在することが示唆されている。そこで、本研究では、Tet3依存の能動的DNA脱メチル化経路に加えて、Tet3に依存しない能動的DNA脱メチル化経路について、DNA脱アミノ化の関与を中心に検討した。
5hmC非依存性能動的DNA脱メチル化としては、AIDによるDNA脱アミノ化の関与が考えられる。そこで、まずAIDタンパク質の受精卵における細胞内局在を免疫染色により調べた。その結果、AIDは受精卵において大部分が細胞質に、一部が核に局在することが明らかとなった。次に、AID KO受精卵において5mCおよび5hmC状態を免疫染色法により検討した。その結果、AIDKOのメスから得られた受精卵においても野生型と同様に雌性ゲノムに5mC、雄性ゲノムに5hmCが認められることが明らかとなった。このことから、AIDは少なくとも受精後に生じるゲノムワイドな能動的DNA脱メチル化に関与しないことが示された。

Research Products

• [Journal Article] GPAT2, a Mitochondrial Outer Membrane Protein in piRNA Biogenesis in Germline Stem Cells (2013)
  • Author(s): Shiromoto Y, Kuramochi-Miyagawa S, Daiba A, Chuma S, Katanaya A, Nishimura K, Ohtaka M, Nakanishi M, Nakamura T, Yoshinaga K, Asada N, Nakamura S, Yasunaga T, Kojima-Kita K, Itou D, Kimura T, Nakano T
  • Journal Title: RNA Volume: 19 Issue: 6 Pages: 803-810
  • DOI: 10.1261/rna.038521.113
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Effects of Dppa3 on DNA methylation dynamics during primordial germ cell development (2013)
  • Author(s): Nakashima H, Kimura T, Kaga Y. Nakatani T, Seki Y, Nakamura T, Nakano T
  • Journal Title: Biol Rep Volume: 88 Issue: 5 Pages: 1-9
  • DOI: 10.1095/biolreprod.112.105932
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] PGC7 binds histone H3K9me2 to protect against conversion of 5MeC to 5HmC in early embryos (2012)
  • Author(s): Nakamura, T., Liu, Y.U., Nakashima, H., Umehara, H., Inoue, K., Matoba, S., Tachibana, M., Ogura, A., Shinkai, Y., Nakano, T
  • Journal Title: Nature Volume: 486 Issue: 7403 Pages: 415-419
  • DOI: 10.1038/nature11093
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 母性因子PGC7はヒストンH3の9番目のリジン残基のジメチル化との結合を介し受精卵における5-メチルシトシンから5-ヒドロキシルメチルシトシンへの変換を阻害する (2012)
  • Author(s): 中村肇伸、仲野徹
  • Journal Title: ライフサイエンス新着論文レビュー Volume: 5093
• [Journal Article] PGC7はヒストンH3K9me2との結合を介して受精卵における5mCから5hmCへの変換を阻害する (2012)
  • Author(s): 中村肇伸
  • Journal Title: 細胞工学 Volume: 31 Pages: 1038-1039
• [Journal Article] Essential role of DPPA3 for chromatin condensation in mouse oocytogenesis (2012)
  • Author(s): Liu YJ, Nakamura T, Nakano T
  • Journal Title: Biol Rep Volume: 86 Issue: 2 Pages: 1-8
  • DOI: 10.1095/biolreprod.111.095018
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] RNAi-mediated knockdown of Xist can rescue the impaired postimplantation development of cloned mouse embryos (2011)
  • Author(s): Matoba S, et al
  • Journal Title: Proc Natl Acad Sci USA Volume: 108 Issue: 51 Pages: 20621-20626
  • DOI: 10.1073/pnas.1112664108
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Expression and purification for protein crystallography of a DNA methylation regulatory protein (2013)
  • Author(s): Nakamura T, Imadome G, Nakano T, Nakamura T, Yamagata Y
  • Organizer: International Symposium on Target recognition and expression mechanism of intrinsically disordered protein
  • Place of Presentation: 横浜
• [Presentation] メチル化制御因子PGC7の機能解析 (2012)
  • Author(s): 中村肇伸
  • Organizer: 第28回配偶子制御セミナー
  • Place of Presentation: 横浜(招待講演)
  • Year and Date: 2012-11-13
• [Presentation] Global DNA hypomethylation and transformation (2012)
  • Author(s): Toshinobu Nakamura, Soichiro Funaki, Toru Nakano
  • Organizer: The 15th US-Japan Cellular and Gene Therapy Conference on Epigenetics in Cancer
  • Place of Presentation: 米国、メリーランド(招待講演)
  • Year and Date: 2012-02-23
• [Presentation] 受精卵における能動的DNA脱メチル化の制御機構の解明 (2012)
  • Author(s): 中村肇伸
  • Organizer: 第6回日本エピジェネティクス研究会年会
  • Place of Presentation: 東京(招待講演)
• [Presentation] 5-methylcytosine hydroxylase TET3-mediated acquisition of astrocytic competence of midgestational neural stem cells (2012)
  • Author(s): Bizen N, Kagawa T, Nakamura T, Nakano T, Taga T
  • Organizer: 10th Stem Cell Research Symposium
  • Place of Presentation: 淡路
• [Presentation] 5-methylcytosine hydroxylase TET3-mediated acquisition of astrocytic competence of midgestational neural stem cells (2012)
  • Author(s): Taga T, Kagawa T, Bizen N, Yamaguchi Y, Kokubu Y, Hattori S, Takao K, Miyakawa T, Inazawa J, Nakamura T, Nakano T
  • Organizer: ISSCR 10 th Annual Meeting
  • Place of Presentation: 横浜
• [Presentation] DNA/ヒストンのメチル化制御による中枢神経系の発生制御:分子機構からヒト精神運動異常様行動を示す遺伝子変異モデルマウスまで (2012)
  • Author(s): 田賀哲也、鹿川哲史、備前典久、山口雄平、国分康博、服部聡子、高雄啓三、宮川剛、稲澤譲治、中村肇伸、仲野徹
  • Organizer: 第33回日本炎症・再生医学会
  • Place of Presentation: 福岡
• [Presentation] 受精卵における能動的DNA脱メチル化の制御機構の解明 (2012)
  • Author(s): 中村肇伸
  • Organizer: 生殖サイクル若手勉強会2012
  • Place of Presentation: 仙台(招待講演)
• [Presentation] PGC7/Stella binds to histone H3K9me2 to protect against conversion of 5mC to 5hmC in early embryos (2012)
  • Author(s): Nakamura T, Nakano T
  • Organizer: Cold Spring Harbor Laboratory meeting EPIGENETICS & CHROMATIN
  • Place of Presentation: 米国
• [Presentation] Regulation of mouse brain development by DNA and histone methylation : From molecular basis to cognitive, behavioral, and motor abnormalities in gene-manipulated model mice (2012)
  • Author(s): Taga T, Kagawa T, Bizen N, Yamaguchi Y, Kokubu Y, Hattori S, Takao K, Miyakawa T, Inazawa J, Nakamura T, Nakano T
  • Organizer: The 35th Annual Meeting of the Japan Neuroscienee Society, Symposium on Epigenetics and neuropsychiatric disorders
  • Place of Presentation: 米国
• [Presentation] 受精卵における能動的メチル化消去の制御機構の解明 (2012)
  • Author(s): 中村肇伸
  • Organizer: 特定領域研究「生殖系列の世代サイクルとエピゲノムネットワーク」第5回公開シンポジウム
  • Place of Presentation: 京都(招待講演)
• [Presentation] ゲノムワイドなDNA低メチル化と発癌との関連 (2012)
  • Author(s): 舟木壮一郎、中村肇伸、中島啓行、奥村明之進、仲野徹
  • Organizer: 第35回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 福岡
• [Presentation] Relationship between DNA modification and histone modification in early embryos (2011)
  • Author(s): Toru Nakano, Toshinobu Nakamura
  • Organizer: The 34th Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan
  • Place of Presentation: 横浜(招待講演)
  • Year and Date: 2011-12-16
• [Presentation] 受精卵における5MeCから5HmCへの変換制御機構の解明 (2011)
  • Author(s): 中村肇伸、Mark Wossidlo、立花誠、眞貝洋一、Jorn Walter、仲野徹
  • Organizer: 文部科学省科学研究費補助金特定領域研究「生殖系列の世代サイクルとエピゲノムネットワーク」第4回公開シンポジウム
  • Place of Presentation: 大阪
  • Year and Date: 2011-11-18
• [Presentation] Reciprocal regulation of DNA methylation and hydroxymethylation in early embryos by histone modification (2011)
  • Author(s): Toshinobu Nakamura, Mark Wossidlo, Makoto Tachibana, Yoichi Shinkai, Jorn Walter, Toru Nakano
  • Organizer: The 84th Annual Meeting of the Japanese Biochemical Society
  • Place of Presentation: 京都(招待講演)
  • Year and Date: 2011-09-21
• [Presentation] 受精卵における5-メチルシトシンから5-ヒドロキシメチルシトシンへの変換 (2011)
  • Author(s): 中村肇伸
  • Organizer: 生殖サイクル若手勉強会2011
  • Place of Presentation: 大阪
  • Year and Date: 2011-07-13
• [Presentation] 受精卵における5-メチルシトシンから5-ヒドロキシメチルシトシンへの変換 (2011)
  • Author(s): 中村肇伸、Mark Wossidlo、立花誠、眞貝洋一、Jom Walter、仲野徹
  • Organizer: 第5回日本エピジェネティクス研究会年会
  • Place of Presentation: 熊本
  • Year and Date: 2011-05-21
• [Remarks]
  • URL: http://www.nagahama-i-bio.ac.jp/guide/kyoin/detail/post-6.html
• [Remarks]
  • URL: http://www.nagahama-i-bio.ac.jp/news/news/2012/05/post_185.html
• [Remarks]
  • URL: http://www.nagahama-i-bio.ac.jp/news/news/2012/06/post_190.html
• [Remarks]
  • URL: http://www.nagahama-i-bio.ac.jp/guide/kyoin/detail/post-6.html